詳細介紹
注:本公司提供試劑盒免費代測服務,。需要其他檢測試劑盒請咨詢銷售人員,。
產品全稱:NFκB 核因子κB免疫學elisa實驗
英文名稱:Nuclear Factor Kappa B(NFkB)ELISA Kit
貨號:GOY-01E11707
規(guī)格:48T/96T
服務:可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等
保存環(huán)境:2-8℃低溫,、避光,、防潮
主要成分:酶標板,試劑,標準品等。
檢測目的:用于測定血清,,血漿及相關液體等樣本,。例如適合檢測包括血清,、血漿、尿液,、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標本..需要而未提供。
具有如下優(yōu)點:
一,、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實驗經費,。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑 1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,,已獲得國家承認的“三證",,每一個產品都有對應的批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產品,,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。 2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,再進行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度,以滿足后面的測定需求,。
| 二,、樣本 1.內源性干擾因素:包括類風濕因子、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體、某些自身抗體等,; 類風濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG,; ②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理; ③檢測抗原時,,可用加入到標本中使RF降解,。 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔),。
2,、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4、標記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5、辣根過氧化物酶標記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶,。
6,、標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,,使用時每瓶用蒸餾水25倍,。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
CTSS / Cathepsin-S 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CTSL1 / Cathepsin-L1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Cathepsin D / CTSD 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CTSC / DPPI 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Cathepsin-B / CTSB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Cathepsin-A / CTSA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CST5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CPE 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CPB1 / PCPB 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CPA2 / Carboxypeptidase-A2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NFκB 核因子κB免疫學elisa實驗蘭膠指示劑 變色硅膠 2~5mm3,5-二庚酮 98%CTGF 人結締組織生長因子
200×200mm HF254型號 N,N,N,N,-四環(huán)氧基-4,,4-二二苯 NPY(humen) 人神經肽Y
200×200mm GF254型號4-乙烯基環(huán)氧環(huán)己烷 98%Ghrelin(Human) 人腦腸肽
200×200mm H型號溴化銫 99.5%Galectin-3(human) 人半乳糖凝集素-3
200×200mm G型號溴化銫 99.9% metals basisMIP-1 Alpha 人巨噬炎性蛋白-1α
100×200mm HF254型號 99.99%MIP-1 Gamma 人巨噬炎性蛋白-1γ
100×200mm GF254型號銫 AR,99.5%MIP-1 Beta 人巨噬炎性蛋白-1β
100×200mm H型號銫 99.9%MIP-2 人巨噬炎性蛋白-2
操作步驟:
1、準備:從冰箱取出試劑盒,,室溫復溫平衡30分鐘,。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液。
3,、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,,固定于框架上,分別設置標準品孔,、待測樣本孔和空白對照孔,,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL,;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,,再加樣本40μL(即樣本5倍);空白對照孔不加,。
4,、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min。
5,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復洗板4次(也可用洗板機按說明書操作洗板),。
6、加酶標工作液:每孔加入酶標工作液50μL,,空白對照孔不加,。
7、溫育:重復4的操作,。
8,、洗板:重復5的操作。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min,。
10,、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,,終止反應(顏色由藍色立轉黃色),。
11、測定:以空白孔調零,,在終止后15分鐘內,,用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。
12、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應的OD值,,計算出標準曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應的樣品濃度,,也可以使用各種應用軟件來計算,。zui終濃度為實際測定濃度乘以倍數(shù)。