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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| Tca-8113 (舌鱗癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0229 |
商品介紹：
名稱(chēng) Tca-8113 (舌鱗癌細(xì)胞) 別稱(chēng)TCA8113; Tca-8113 年齡（性別）女 組織來(lái)源舌癌 生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述Tca-8113細(xì)胞源自屬于I級(jí)鱗癌(T2N1Amo，Ⅱ期)的原位舌癌的活組織檢查切片,。通過(guò)干貼壁方法建立于1987年,，Tca-8113細(xì)胞傳代時(shí)間為38小時(shí),。傳代第3天有絲分裂指數(shù)為61%，移植效率為86%,，軟瓊脂克隆生成率為53-57.7%,。Tca-8113細(xì)胞經(jīng)ATS處理后在ICR和C57B1小鼠中成瘤，電鏡和組化特征與鱗癌相符,。(STR檢測(cè)位點(diǎn)同HELA) 生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640＋20% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% 溫度：37℃ |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
大鼠神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
抗麥角蛋白(Gliadin)抗體(IgA)免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
大鼠胺2,3-雙加氧(IDO)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
綿羊白介素1α(IL-1α)免疫試劑盒*直銷(xiāo)
小鼠腎素前體免疫試劑盒進(jìn)口,、組裝
抗生長(zhǎng)激素(GH)抗體免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
豚鼠端粒(TE)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
大鼠神經(jīng)生長(zhǎng)因子前體(proNGF)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
小鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
Tca-8113 (舌鱗癌細(xì)胞)2 g Sodium orthovanadate （酯抑制劑） Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存
250mL Glucose Solution（葡萄糖溶液）,20%（W/V) Glucose Solution,20%（W/V) 常溫保存
1個(gè) 暗盒（5×7英寸） Cassette 室溫
500mL Blotto-Tween in TBS Blotto-Tween in TBS 常溫保存
季銨鹽類(lèi)中和劑管（帶棉簽） 10ml*20
1瓶 MCF 7B細(xì)胞株 MCF 7B 低溫運(yùn)輸和保存
TGY瓊脂 250g
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