操作步驟:
1,、準(zhǔn)備:從冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘,。
2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液成原倍的洗滌液,。
3,、加標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本:取足夠數(shù)量的酶標(biāo)包被板,,固定于框架上,分別設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔,、待測(cè)樣本孔和空白對(duì)照孔,記錄各孔位置,,在標(biāo)準(zhǔn)品孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;待測(cè)樣本孔中先加入待測(cè)樣本10μL,,再加樣本40μL(即樣本5倍);空白對(duì)照孔不加,。
4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育30min,。
5,、洗板:棄去液體,,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,,如此重復(fù)洗板4次(也可用洗板機(jī)按說(shuō)明書(shū)操作洗板)。
6,、加酶標(biāo)工作液:每孔加入酶標(biāo)工作液50μL,,空白對(duì)照孔不加。
7,、溫育:重復(fù)4的操作,。
8,、洗板:重復(fù)5的操作。
9,、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,,37℃避光顯色15min,。
10,、終止:取出酶標(biāo)板,每孔加終止液50μL,,終止反應(yīng)(顏色由藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11,、測(cè)定:以空白孔調(diào)零,,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長(zhǎng)測(cè)量各孔的吸光值(OD值),。
12、計(jì)算:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)品的濃度及對(duì)應(yīng)的OD值,,計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程,,再根據(jù)樣本的OD值,,在回歸方程上計(jì)算出對(duì)應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來(lái)計(jì)算,。zui終濃度為實(shí)際測(cè)定濃度乘以倍數(shù),。
注:本公司提供試劑盒免費(fèi)代測(cè)服務(wù)。需要其他檢測(cè)試劑盒請(qǐng)咨詢銷(xiāo)售人員,。
產(chǎn)品全稱:GAPDH 甘油醛-3-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Glyceraldehyde-3-Phosphate Dehydrogenase(GAPDH)ELISA Kit
貨號(hào):GOY-01E11995
規(guī)格:48T/96T
服務(wù):可提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),以及產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)和技術(shù)指導(dǎo)等
保存環(huán)境:2-8℃低溫,、避光、防潮
主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等,。
檢測(cè)目的:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本,。例如適合檢測(cè)包括血清,、血漿,、尿液、胸腹水,、灌洗液、腦脊液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本..需要而未提供,。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一、高效,、靈敏、特異的抗體,;
二,、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三、吸附性能好,,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,;
四、適用血清,、血漿、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
五,、性價(jià)比非常好,,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑 1.試劑的選擇:國(guó)家明確要求要采用批批檢定的形式對(duì)ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,,已獲得國(guó)家承認(rèn)的“三證",,每一個(gè)產(chǎn)品都有對(duì)應(yīng)的批號(hào),,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會(huì)有過(guò)期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇。 2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測(cè)定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,,以滿足后面的測(cè)定需求。 | 二,、樣本 1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,; 類風(fēng)濕因子的控制方法: ①用F(ab)2替代完整的IgG,; ②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理; ③檢測(cè)抗原時(shí),,可用加入到標(biāo)本中使RF降解。 |
試劑配制:
1,、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2,、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3,、樣品(Sample Diluent):1×20ml/瓶,。
4,、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6,、標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7,、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8,、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9,、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水25倍,。
10,、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4),。
250mL Diluting Solution,2X Diluting Solution,,2X 常溫保存
MH瓊脂(MHA) Mueller-Hinton Agar 250g 0.78-50 ng/mL 馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
2 ug pLVX-DsRed-Monomer-N1 pLVX-DsRed-Monomer-N1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人絨毛蛋白(CVL)ELISA試劑盒
1mL 單裂解液(DNA) Single Cell Lysis Solution 4℃保存 1.56-100 U/L ELISA Kit for Human Calcitonin gene-related peptide 2
1瓶 HFL1株 HFL1 低溫運(yùn)輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Talin-2
100mL ACES Buffer,,0.5M,pH7.0 ACES Buffer,0.5M,pH7.0 常溫保存GAM肉湯進(jìn)口,、國(guó)產(chǎn)Anaerobic Broth250克用于專性厭氧菌培養(yǎng)
2 ug SD1211- 3 SD1211- 3 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存 78-5000 pg/mL 人過(guò)氧化還原4(PRDX4)ELISA試劑盒
2 ug pRNATin-H1.2/Hygro pRNATin-H1.2/Hygro 低溫運(yùn)輸,,-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人α滑行蛋白(Alpha-taxilin)ELISA試劑盒
50次 柱式細(xì)菌DNAout(含) Column Bacterial DNAOUT 常溫保存(需要-20℃保存) 1.56-100 ng/mL 人組織因子途徑抑制物2(TFPI-2)ELISA試劑盒
500mL Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered] Krebs-Ringer Solution [Bicarbonate Buffered] 常溫保存 0.625-40 ng/mL 人載脂蛋白H(APOH)ELISA試劑盒
1000支 10 μL RNase-free 白吸頭(袋裝) 常溫
GAPDH 甘油醛-3-磷酸脫氫酶檢測(cè)試劑盒Anti-UCN/FITC 熒光素標(biāo)記新型血管活性因子UCN抗體(小鼠,、大鼠)IgG
Anti-Urocortin 3/FITC 熒光素標(biāo)記尿皮質(zhì)素UCN3抗體IgG
Anti-UCP-1/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白1抗體IgG
Anti-UCP-2/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白2抗體IgG
Anti-UCP-3/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體脫偶連蛋白3抗體IgG
Anti-UG/FITC 熒光素標(biāo)記珠蛋白抗體IgG
Anti-UMOD/FITC 熒光素標(biāo)記UMOD抗體IgG
Anti-ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人,、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgG