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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-18 14:46:03瀏覽次數(shù)：445
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0903 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0903 |
商品介紹：
名稱 大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞 2.組織來(lái)源：腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞分離自腎組織；腎臟是機(jī)體的重要器官,，它的基本功能是生成尿液,，借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),，如葡萄糖,、蛋白質(zhì)、氨基酸,、鈉離子,、鉀離子、碳酸氫鈉等,，以調(diào)節(jié)水,、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,，生成腎素,、促紅細(xì)胞生成素、活性素D3,、前列腺素,、激肽等，又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,，保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。腎臟移植是臨床上治療慢性腎功能衰竭的有效方法,，然而這種方法受到供體腎短缺的限制。腎細(xì)胞移植可部分解決供體腎短缺的問(wèn)題,，是未來(lái)可以替代腎臟移植的*方法,。因此，體外腎細(xì)胞的培養(yǎng)受到國(guó)內(nèi)外有關(guān)專家的密切關(guān)注,。原代腎細(xì)胞作為一種常用的腎臟毒理學(xué)研究對(duì)象,，其分離方法主要有機(jī)械研磨分離法和酶消化法，酶消化法因?qū)?xì)胞損傷小,、分離效果好而優(yōu)于機(jī)械研磨分離法,；目前常用的酶消化法主要是胰蛋白酶消化法和膠原酶消化法。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞經(jīng)檢測(cè)，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R056 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 FGF18 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ARTN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TNFSF12 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 ACVR2B 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 HBEGF 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 RBP4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TMEFF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 GFRA2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 SERPINF2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TNFSF10 / TRAIL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞氯,、碘中和劑管（帶棉簽） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Protein FAM151A
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Ferritin light chain
0.312-20 ng/mL 人基質(zhì)金屬蛋白2/明膠A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA試劑盒
UVM添加劑1（萘啶酮酸4.5mg） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5支
酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（YPD） 英文名稱：Yeast Peptone Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Malate dehydrogenase, mitochondrial
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human C-telopeptide of Collagen alpha-1(II) chain
15.6-1000 pg/mL 人Fc片段免疫球蛋白G (FclgG)ELISA試劑盒
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