產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
前列腺上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0761 |
商品介紹:
名稱 前列腺上皮細(xì)胞 2.組織來源:前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介: 人前列腺上皮細(xì)胞分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性*的性腺器官;前列腺是不成對(duì)的實(shí)質(zhì)性器宮,,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,,底朝上,,與膀胱相貼,尖朝下,,抵泌尿生殖膈,,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸,。前列腺腺體的中間有尿道穿過,,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時(shí),,排尿首先受影響,。前列腺是機(jī)體非常少有的,具有內(nèi),、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,,是構(gòu)成精液主要成分,;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素",。前列腺上皮細(xì)胞與前列腺的功能關(guān)系密切,,上皮細(xì)胞的損傷是前列腺炎的主要病癥,重度的前列腺炎患者的前列腺液內(nèi)可檢測(cè)到脫落的上皮細(xì)胞,,這是上皮細(xì)胞損傷的標(biāo)志,。炎癥發(fā)生時(shí),與炎癥相關(guān)的一些炎癥因子可能發(fā)生變化,。因此,,體外培養(yǎng)前列腺上皮細(xì)胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎(chǔ)。前列腺主要特征如下:①前列腺結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)均受雄性激素的調(diào)控,;②基底細(xì)胞主要表達(dá)高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-5,、CK-14),基底上皮細(xì)胞可分化成管腔上皮細(xì)胞,;③前列腺上皮細(xì)胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學(xué)和激素性致癌作用提供了機(jī)會(huì),。 5.方法簡(jiǎn)介: 實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺上皮細(xì)胞采用先中性蛋白酶消化、后膠原酶-胰蛋白酶聯(lián)合消化并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的人前列腺上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息: 包被條件鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H019 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳2-3代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%,;CO2,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,易碎,,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
MAP2K6 / MKK6 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PTEN 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PPP2CA 基因全長(zhǎng)ORF克隆
IL10Ra 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ADPGK 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRII 基因全長(zhǎng)ORF克隆
KLK-7 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRSF10C / TRAILR3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
CD89 / FCAR 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
TNFRSF10D / TRAILR4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
前列腺上皮細(xì)胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein M
15.6-1000 pg/mL 綿羊痘病毒(SPPV)核酸檢測(cè)試劑盒
0.312-20 ng/mL 人細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Progonadoliberin-1
RV肉湯(EP) 英文名稱:Rappaport Vassiliadis Salmonella Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g
沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)(2015藥典) 英文名稱:Sabouraud Dextrose Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
改良克氏雙糖鐵培養(yǎng)基 英文名稱:Modified KIA Iron Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g
31.2-2000 pg/mL B組輪狀病毒(HRV-B)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Von Hippel-Lindau disease tumor suppressor
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Lysophospholipid acyltransferase 5