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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-08 16:44:41瀏覽次數(shù)：352
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0601 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| Daoy (髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0601 |
商品介紹：
名稱 Daoy (髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 別稱DAOY; D324 Med; D-324 Med; D324 MED; D-324MED; D324 種屬人類 年齡（性別）男性，4歲 組織來源結(jié)締組織增生性小腦髓母細(xì)胞 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述The Daoy cell line was established in 1985 by P. F Jacobsen of the Royal Perth Hospital in Western Australia. The line was derived from biopsy material taken from a tumor in the posterior fossa of a 4 year old boy. 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1%P/S 推薦傳代比例1:3-1:6 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~33.6小時 (PubMed=2993532); 34小時 (ATCC) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (The cells form serially transplantable intercranial and subcutaneous tumors.) |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CD248 基因全長ORF克隆
TCTN1 基因全長ORF克隆
OTOR 基因全長ORF克隆
PCDHGB7 基因全長ORF克隆
PCDHGA1 基因全長ORF克隆
PCDHGA3 基因全長ORF克隆
PCDHGB3 基因全長ORF克隆
PCDHGA10 基因全長ORF克隆
PCDHGC4 基因全長ORF克隆
TMEM134 基因全長ORF克隆
Daoy (髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 副溶血性弧菌成套生化鑒定管（SN/T0173-2010) 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：16種*1套/盒*5盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Aquaporin-2
尿素卵黃雙糖培養(yǎng)基 英文名稱：Urea- Egg Yolk double sugar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人隱藏家族蛋白1(CFC1)ELISA試劑盒
SS瓊脂 英文名稱：Salmonella Shigella Agar 產(chǎn)品規(guī)格：250g
馬尿酸鈉培養(yǎng)基 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.78-50 ng/mL 人環(huán)指蛋白39(RNF39)ELISA試劑盒
3%氯化鈉堿性蛋白胨水 英文名稱：3%Sodium Chloride Peptone Water 產(chǎn)品規(guī)格：9ml*20支/包
0.312-20 ng/mL 內(nèi)毒素(Endotoxin)ELISA試劑盒
復(fù)方中和劑管（帶棉簽） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20
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