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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-13 09:40:05瀏覽次數(shù)：301
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0755 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0755 |
商品介紹：
名稱 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 2.組織來源：胰腺組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞分離自胰腺組織,；胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道,。胰液中含有碳酸氫鈉,、胰蛋白酶原、脂肪酶,、淀粉酶等,。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質(zhì),、脂肪和糖的作用,。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細(xì)胞組成：α細(xì)胞,、β細(xì)胞,、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,，升高血糖,；β細(xì)胞分泌胰島素，降低血糖,；γ細(xì)胞分泌生長抑素,，以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌,；PP細(xì)胞分泌胰多肽,，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮,。成體胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞作為胰腺前體細(xì)胞,，已證實具多向分化潛能，在合適的外源性刺激下可分化成胰島樣細(xì)胞,，胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞免疫原性如何,，轉(zhuǎn)分化的胰島樣細(xì)胞在治療糖尿病時是否發(fā)生免疫排斥反應(yīng)，對干細(xì)胞臨床治療糖尿病具有重要意義,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R017 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
IL27Ra 基因全長ORF克隆
CTSS 基因全長ORF克隆
CTSL1 基因全長ORF克隆
CCL20 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
CTSC / DPPI 基因全長ORF克隆
CTSB 基因全長ORF克隆
TNFRSF4 基因全長ORF克隆
CystatinA 基因全長ORF克隆
CA II 基因全長ORF克隆
CCL21 基因全長ORF克隆
大鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞0.156-10 ng/mL 人膽汁酸受體(Bile acid receptor)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL 人干擾素誘導(dǎo)的跨膜蛋白3(IFITM3)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Growth hormone receptor
酸性肉湯 英文名稱：Acid Borth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
創(chuàng)傷弧菌成套生化鑒定管 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9種*2套/盒*5盒
0.156-10 ng/mL 人μ阿片受體(M-OR-1)ELISA試劑盒
YPDA培養(yǎng)基 英文名稱：YPDA Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.625-40 ng/mL 人組織蛋白去乙?；?(HDAC8)ELISA試劑盒
DNA瓊脂 英文名稱：DNase Agar 產(chǎn)品規(guī)格：100
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Testican-2
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