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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-08 16:16:12瀏覽次數(shù)：332
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0583 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| MH-S (小鼠肺泡巨噬細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0583 |
商品介紹：
名稱(chēng) MH-S (小鼠肺泡巨噬細(xì)胞) 種屬小鼠 年齡（性別）7周齡 組織來(lái)源肺巨噬細(xì)胞 生長(zhǎng)特性半貼半懸 細(xì)胞形態(tài)巨噬細(xì)胞樣 背景描述The MH-S cell line was derived by SV40 transformation of an adherent cell enriched population of mouse alveolar macrophages. 生物安全等級(jí)2 生長(zhǎng)培養(yǎng)基RPMI-1640＋0.05mM β-mercaptoethanol＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5% 溫度：37℃ 抗原表達(dá)情況CD11b (Mac-1); Class II antigens (I-A); T antigen 基因表達(dá)情況interleukin 1 (IL-1) |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
F2RL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
F2R 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RCN1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
RCN3 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MUC7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
PDGFRL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
C18orf54 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ST3GAL2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
HSD17B7 基因全長(zhǎng)ORF克隆
ST3GAL4 基因全長(zhǎng)ORF克隆
MH-S (小鼠肺泡巨噬細(xì)胞)0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Protein O-mannosyl-transferase 1
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Switch-associated protein 70
普通肉湯培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Broth Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
D-阿拉伯糖-雙岐桿菌鑒定 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human VPS10 domain-containing receptor SorCS1
1.56-100 ng/mL 人黏著斑激(FAK/FADK 1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 白E(IgE)ELISA試劑盒
細(xì)菌蛋白胨 英文名稱(chēng)：Peptone Bacteriological 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL 人組蛋白脫乙酰化 (HDAC7)ELISA試劑盒
緩沖動(dòng)力-硝酸鹽培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Buffered Power - nitrate medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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