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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠心臟干細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1107 |
商品介紹：
名稱 小鼠心臟干細胞 2.組織來源：心臟組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠心臟干細胞分離自心臟組織,；心臟是脊椎動物身體中最重要的一個器官,，主要功能是為血液流動提供壓力，把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構成，左心房、左心室,、右心房、右心室四個腔組成,。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣）,，這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,，而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,，向器官,、組織提供充足的血流量，以供應氧和各種營養(yǎng)物質,，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳,、無機鹽、尿素和尿酸等）,，使細胞維持正常的代謝和功能,。研究發(fā)現(xiàn)，心臟干細胞是一種多潛能細胞,，具有再生和克隆能力,，并可分化為心肌細胞、平滑肌細胞和血管內(nèi)皮細胞,。體內(nèi)研究顯示,，從心臟中分離出的心臟干細胞，經(jīng)體外簡單培養(yǎng),、增殖和標記后,，移植到心肌梗死邊緣區(qū)域，心梗血流動力學和心室壁厚度較對照組明顯改善,，心肌梗死邊緣區(qū)域發(fā)現(xiàn)有標記的心肌細胞,、平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞。盡管其新生心肌細胞較小,，但表達一些特殊肌蛋白如心臟肌球蛋白重鏈、α-肌動蛋白,、α-輔肌動蛋白,、連接蛋白等,，證實了心臟干細胞對心肌梗死的修復作用。干細胞移植治療是目前心肌梗死和缺血性心臟病細胞重建的主要方法,，成體干細胞中的c-kit陽性心臟干細胞因其來源于心臟,，有定向心臟細胞系分化的趨勢，體內(nèi)外可以分化成心肌細胞,、血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞,，同時自體移植不存在免疫排斥反應及倫理問題已經(jīng)成為目前研究的熱點。短期內(nèi)獲得治療量的自體心臟干細胞是這一治療應用于臨床的關鍵所在,。因此,，研究一種新的分離培養(yǎng)方法可在短時期內(nèi)獲得大量純度較高的自體c-kit陽性心臟干細胞成為目前干細胞領域研究的熱點問題之一。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠心臟干細胞采用機械剪碎組織,、膠原酶分次消化法結合差速貼壁,、心臟干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠心臟干細胞經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M135 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)長梭形 傳代特性可傳2-3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
MEP1A 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
tsukushin 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
PIGR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
FABP2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL1F1 / IL1α 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL36RN / IL1F5 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL36RN / IL1F5 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
IL36G / IL1F9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
IL36G / IL1F9 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
IL1RN / IL1F3 轉錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
小鼠心臟干細胞0.156-10 ng/ml 人凝血噁烷A合成(TXA synthase)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Protransforming growth factor alpha
0.156-10 ng/mL 人間α-抑制因子重鏈H5(ITIH5L)ELISA試劑盒
Honda氏產(chǎn)毒肉湯 英文名稱：Honda Toxin-Producing Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cystine/glutamate transporter
15.6-1000 ng/mL 硫酸軟骨素(CS)ELISA試劑盒
梭菌強化培養(yǎng)基 英文名稱：Reinforced medium for clostridia 產(chǎn)品規(guī)格：250g
含225ml FB1增菌液均質袋 英文名稱：FB1 Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包
3.9-250 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein(a)
0.156-10 ng/mL 鹿特定基因序列(Deer)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
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