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詳細(xì)介紹
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1299 |
商品介紹：
名稱 子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞 2.組織來源：子宮組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間,，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),，可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮,，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成,，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成,，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5,；基底層較薄較致密,，約占1/5，功能層可剝脫,，而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的最內(nèi)層，位于子宮腔面,，在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H208 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳3-5代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
狗 IL2RB / IL2 Receptor beta 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 IL3RA 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 KLK1 / Kallikrein 1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 CD122 / IL2RB / IL2 Receptor beta 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 SPARCL1 / SPARC-like 1 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 ANGPTL4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
小鼠 PROC1 / Protein C / PROC 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/UT31413II/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
GYPA / CD235a / Glycophorin A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
RAB27B 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞Saccharomyces cerevisiae抗心肌肌球蛋白抗體檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces cerevisiae可溶性補(bǔ)體受體檢測(cè)試劑盒
Candida boidinii乙型肝炎病前S1抗原檢測(cè)試劑盒
Candida boidinii清道夫受體B檢測(cè)試劑盒
Candida boidinii鞘磷脂合成2檢測(cè)試劑盒
Candida boidinii補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白3檢測(cè)試劑盒
Candida boleticola跨膜蛋白98檢測(cè)試劑盒
Debaryomyces hansenii var. hansenRas同源基因家族成員A檢測(cè)試劑盒
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