詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
SNU-719 (胃癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0619 |
商品介紹:
名稱 SNU-719 (胃癌細(xì)胞) 別稱SNU719; NCI-SNU-719 年齡(性別)男,;53歲 組織來源胃 生長特性懸浮細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)圓形(成串) 背景描述The line was established in April 1984. The patient was a smoker. 100 pack years. 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640+10% FBS+1%P/S 推薦傳代比例1:3-1:6 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度:液氮 培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,5% 溫度:37℃ |
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),,懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時動作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報告:
一,、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
MEN1 基因全長ORF克隆
MAP3K14 基因全長ORF克隆
HSPH1 基因全長ORF克隆
SRPK1 基因全長ORF克隆
MLANA 基因全長ORF克隆
FOXP1 基因全長ORF克隆
S100A14 基因全長ORF克隆
HIPK4 基因全長ORF克隆
PHF1 基因全長ORF克隆
KIR3DL1 基因全長ORF克隆
SNU-719 (胃癌細(xì)胞)78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor receptor superfamily member 8
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Complement receptor type 2
高鹽察氏瓊脂 英文名稱:Salt Czapek Dox Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
含225ml 緩沖蛋白胨水(BPW)均質(zhì)袋 英文名稱:Buffered Peptone Water 產(chǎn)品規(guī)格:10個/包
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Dihydropteridine reductase
0.312-20 ng/mL 雌三醇(E3)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人β內(nèi)啡肽(β-EP)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein F
0.156-10 ng/mL 人核因子κB受體活化因子(RANK)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人慢肌肌鈣蛋白C(TNNC1)ELISA試劑盒