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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-18 16:24:40瀏覽次數(shù)：304
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0905 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 小鼠腎小球系膜細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0905 |
商品介紹：
名稱 小鼠腎小球系膜細(xì)胞 2.組織來源：腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 小鼠腎小球系膜細(xì)胞分離自腎小球組織,；腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團(tuán)毛細(xì)血叢,，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構(gòu)造,。血液經(jīng)由入球小動(dòng)脈進(jìn)入腎小球,。腎小球內(nèi)的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈,，而是流入出球小動(dòng)脈,。在腎小球內(nèi)，微血管受到高壓,，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進(jìn)行,。微血管中的血液經(jīng)由超濾作用之后，形成濾液,，滲入鮑氏囊內(nèi),。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率,。腎小球系膜是位于腎小球毛細(xì)血管袢之間的一種特殊間充質(zhì),，由系膜細(xì)胞和系膜基質(zhì)組成。腎小球系膜細(xì)胞是腎小球內(nèi)非?；钴S的細(xì)胞,，具有分泌細(xì)胞基質(zhì)、產(chǎn)生細(xì)胞因子,、吞噬和清除大分子物質(zhì)及類似平滑肌細(xì)胞收縮的功能,。腎小球系膜細(xì)胞增生和基質(zhì)的過多產(chǎn)生是多種腎小球腎炎的主要病理表現(xiàn)。腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)是研究系膜擴(kuò)張、瘢痕形成和腎小球硬化的理想方法,。系膜細(xì)胞的主要作用可能有：①收縮作用,，入球小動(dòng)脈和出球動(dòng)脈的收縮作用受系膜細(xì)胞的調(diào)節(jié)，以影響毛細(xì)血管袢的內(nèi)壓和濾過率,；②支持作用,，它填充于毛細(xì)血管袢之間，支持毛細(xì)血管的位置,；③吞噬作用,，能吞噬被阻留在基膜內(nèi)的大分子物質(zhì)和蛋白質(zhì)；④分泌腎素,，在腎缺血或免疫復(fù)合物沉積時(shí),，系膜細(xì)胞增生且分泌腎素。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球系膜細(xì)胞采用機(jī)械研磨法結(jié)合不同孔徑不銹鋼網(wǎng)篩過濾后使用膠原酶消化制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腎小球系膜細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-M057 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 CXCL9 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 WNT5A 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TGF-beta2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TRHDE 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CXCL11 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CXCL1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TREM2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 TNFRSF19 / TROY 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 CXCL15 / Lungkine 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠 Thrombopoietin / THPO 基因全長(zhǎng)ORF克隆
小鼠腎小球系膜細(xì)胞0.312-20 ng/mL 硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA試劑盒
0.625-40 ng/mL 人Sestrin 1(SESN1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human V(D)J recombination-activating protein 2
緩沖李氏菌增菌肉湯基礎(chǔ)(BLEB) 英文名稱：Buffered Listeria Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase
15.6-1000 pg/mL 人S100B蛋白(S100-B)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Integrin alpha-4
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase 5
0.156-10 ng/mL 人黑素細(xì)胞蛋白PMEL(Melanocyte protein PMEL)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL ELISA Kit for Human Glutamine synthetase
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