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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠尿道上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0941 |
商品介紹：
名稱 大鼠尿道上皮細胞 2.組織來源：尿道組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠尿道上皮細胞分離自尿道管組織；尿道是從膀胱通向體外的管道,。尿道上皮細胞主要功能：①尿道上皮細胞排列在膀胱表面,，它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細胞組成,；②上皮細胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸，它們具有多種防御機制來阻止病原體粘著,，保持泌尿器溶解物的不滲透性,；③膀胱上皮細胞表達雌激素α、β受體,，上皮生長因子受體和纖維母細胞生長因子受體,，在損傷和感染時，這些受體對膀胱上皮細胞起著重要作用,；④能釋放許多細胞因子,、免疫系統(tǒng)介質。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠尿道上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠尿道上皮細胞經PCK免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-R070 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 RAC2 基因全長ORF克隆
大鼠 KRT14 基因全長ORF克隆
大鼠 SRI 基因全長ORF克隆
大鼠 SFR1 基因全長ORF克隆
大鼠 NAPA 基因全長ORF克隆
大鼠 GNPDA1 基因全長ORF克隆
大鼠 GTPBP5 基因全長ORF克隆
大鼠 PPT2 基因全長ORF克隆
大鼠 PLBD1 基因全長ORF克隆
大鼠 G6PC 基因全長ORF克隆
大鼠尿道上皮細胞0.312-20 ng/mL 腦膜炎奈瑟菌A群(NM-A)核酸檢測試劑盒
大豆酪蛋白消化物瓊脂培養(yǎng)基USP 英文名稱：Tryptose Soya Broth 產品規(guī)格：250g
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Parvalbumin alpha
0.39-25 ng/mL 人解整合素樣金屬蛋白9(ADAM9)ELISA試劑盒
抗生素檢測培養(yǎng)基II 英文名稱：Antibiotic Agar No.2 產品規(guī)格：250g
15.6-1000 pg/mL 前列腺素E2(Prostaglandin E2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 豬鏈球菌通用型(SS-U)核酸檢測試劑盒
0.156-10 ng/mL 人五聚素3(PTX3)ELISA試劑盒
培養(yǎng)基（蛋白胨水） 英文名稱：Indole Medium 產品規(guī)格：10g
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Radical S-adenosyl methionine domain-containing protein 2
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