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詳細介紹
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠前列腺干細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1221 |
商品介紹：
名稱 大鼠前列腺干細胞 2.組織來源：前列腺 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠前列腺干細胞分離自前列腺組織,；前列腺（Prostate）是雄性*的性腺器官；前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,，由腺組織和肌組織構(gòu)成,。前列腺如栗子，底朝上,，與膀胱相貼,，尖朝下，抵泌尿生殖膈,，前面貼恥骨聯(lián)合,，后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,，扼守著尿道上口,，所以,，前列腺有問題時，排尿首先受影響,。前列腺是機體非常少有的,，具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺,。作為外分泌腺,，前列腺每天分泌前列腺液，是構(gòu)成精液主要成分,；作為內(nèi)分泌腺,，前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠前列腺干細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過前列腺干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠前列腺干細胞經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R178 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)長梭形 傳代特性可傳3代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CD147 / EMMPRIN ELISA配對抗體
Urokinase / PLAU / UPA ELISA配對抗體
Neuropilin-2 / NRP2 ELISA配對抗體
小鼠 CD5L ELISA配對抗體
DPP7 / DPPII / DPP2 ELISA配對抗體
CLEC4A / CLECSF6 / DCIR ELISA配對抗體
CD89 / FCAR ELISA配對抗體
BAMBI / NMA ELISA配對抗體
PDK / PDZ binding kinase / TOPK ELISA配對抗體
小鼠 SerpinF2 ELISA配對抗體
大鼠前列腺干細胞Pseudomonas straminea乙脫氫1家族成員A2檢測試劑盒
Pseudomonas tolaasii抗核IgA抗體檢測試劑盒
Pseudomonas chlororaphis抗核IgM抗體檢測試劑盒
Burkholderia cepacia缺氧誘導因子1α檢測試劑盒
Achromobacter xylosoxidans食道癌相關(guān)基因4檢測試劑盒
Stenotrophomonas maltophilia溶血?；D(zhuǎn)移檢測試劑盒
Comamonas testosterone藍氏賈弟鞭毛蟲IGG抗體檢測試劑盒
Pseudomonas lundensis20-a羥基孕酮檢測試劑盒
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