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產(chǎn)品名稱：小鼠KI-67抗原(MKI67)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒案例
英文名稱：MKI67ELISAkit
存儲：4℃保存6個(gè)月
運(yùn)輸方式：快遞發(fā)貨
檢測標(biāo)本：血清，血漿,，尿液,，胸腹水，腦脊液,，細(xì)胞培養(yǎng)上清,，組織勻漿等。
小鼠KI-67抗原(MKI67)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒案例ELISA方法的基本原理是：
①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,，并保持其免疫活性,。
②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,，又保留酶的活性,。在測定時(shí)，把受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng),。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,，zui后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析,。由于酶的催化頻率很高,，故可極大地地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度,。因此,，ELISA檢測是一項(xiàng)定位、定性和定量(敏感度可達(dá)每毫升ng~pg水平)的綜合技術(shù),。
小鼠KI-67抗原(MKI67)elisa酶聯(lián)免疫試劑盒案例操作步驟：
1.編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號,，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔,、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）
2.加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl,。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻,，
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘,。
4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體,，甩干，每孔加滿洗滌液,，靜置 30 秒后棄去,，如此 重復(fù) 5 次，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,，空白孔除外。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5,。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl,，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10 分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50µl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測定：以空白空調(diào)零,，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
計(jì)算和結(jié)果判定：
試驗(yàn)有效性：陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
臨界值（CUT OFF）計(jì)算：臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
陰性判定：樣品 OD 值< 臨界值（CUT OFF）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)陰性 陽性判定：樣品 OD 值≥ 臨界值（CUT OFF）者為金黃色葡萄球菌腸毒素(SE)陽性,。
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