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詳細(xì)介紹
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 結(jié)腸癌組織源細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1111 |
商品介紹：
名稱(chēng) 結(jié)腸癌組織源細(xì)胞 2.組織來(lái)源：結(jié)腸癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞分離自患有結(jié)腸癌病人的結(jié)腸癌組織,；結(jié)腸癌是常見(jiàn)的發(fā)生于結(jié)腸部位的消化道惡性腫瘤,，好發(fā)于直腸與乙狀結(jié)腸交界處，以40～50歲年齡組發(fā)病率最高,，男女之比為2～3：1。發(fā)病率占胃腸道腫瘤的第3位,。結(jié)腸癌主要為腺癌、黏液腺癌,、未分化癌。大體形態(tài)呈息肉狀,、潰瘍型等,。結(jié)腸癌可沿腸壁環(huán)行發(fā)展,，沿腸管縱徑上下蔓延或向腸壁深層浸潤(rùn)，除經(jīng)淋巴管,、血流轉(zhuǎn)移和局部侵犯外，還可向腹腔內(nèi)種植或沿縫線,、切口面擴(kuò)散轉(zhuǎn)移,。慢性結(jié)腸炎患者、結(jié)腸息肉患者,、男性肥胖者等為易感人群,。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞不僅廣泛應(yīng)用于分子,、細(xì)胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)研究，如蛋白質(zhì)組學(xué),、基因組學(xué),、細(xì)胞株（系）研究,、DNA,，RNA和遺傳學(xué)研究等,，還可應(yīng)用于當(dāng)今熱門(mén)的生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)如藥物篩選,、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等,。人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有不可替代性作用,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源細(xì)胞采用膠原酶消化,、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái),，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人結(jié)腸癌組織源細(xì)胞經(jīng)檢測(cè),，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H137 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
ITK Kinase 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
ITK Kinase 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
CD34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD34 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
GPC6 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD55 / DAF 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD55 / DAF 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
CD84 / SLAMF5 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
CD84 / SLAMF5 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
S6K / RPS6KB1 基因全長(zhǎng)ORF克隆 (表達(dá)載體), 無(wú)標(biāo)簽
結(jié)腸癌組織源細(xì)胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human C4b-binding protein beta chain
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dipeptidase 1
15.6-1000 pg/mL 人心肌肌鈣蛋白T()ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 呼吸道合胞病毒(RSV)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Hexokinase-3
78-5000 pg/mL 人多藥耐藥相關(guān)蛋白9(MRP9)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Lutropin-choriogonadotropic hormone receptor
1%NaCl阿拉伯糖 英文名稱(chēng)： 產(chǎn)品規(guī)格：20支
BAT培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：BAT Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Proton-associated sugar transporter A
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