化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| NCI-H2126 (肺癌細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0621 |
商品介紹：
名稱 NCI-H2126 (肺癌細(xì)胞) 別稱H2126; H-2126; NCIH2126 種屬人類 年齡（性別）男性,，65歲 組織來源肺腺癌，非小細(xì)胞肺癌,；轉(zhuǎn)移部位：胸腔積液 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述An EBV-transformed lymphoblastoid cell line from the same patient is available as NCI-BL2126. 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋10% FBS＋1%P/S 推薦傳代比例1:2-1:4 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時(shí)間~57小時(shí) (PBCF) 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice (Tumors developed within one month in 4/5 nude mice inoculated subcutaneously with 10^7 cells.) |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
VAMP1 基因全長ORF克隆
PRKCH 基因全長ORF克隆
FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 基因全長ORF克隆
CLPB 基因全長ORF克隆
CD44 基因全長ORF克隆
ARAF 基因全長ORF克隆
KIF1B 基因全長ORF克隆
SEMA3B 基因全長ORF克隆
LCMT2 基因全長ORF克隆
PAK4 基因全長ORF克隆
NCI-H2126 (肺癌細(xì)胞) 0.312-20 ng/mL. 牛特定基因序列(Bovine)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
Preston肉湯添加劑 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Testin
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Syndecan-2
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Hyaluronidase-4
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Dickkopf-related prot
化工儀器網(wǎng)