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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠胃平滑肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1301 |
商品介紹：
名稱(chēng) 大鼠胃平滑肌細(xì)胞 2.組織來(lái)源：胃組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠胃平滑肌細(xì)胞分離自胃組織；胃柔軟,，活體呈橘紅色,。胃空虛時(shí)形成許多皺襞，充盈時(shí)變平坦,。胃壁由粘膜,、粘膜下膜、肌膜和漿膜四層構(gòu)成,。粘膜上皮為柱狀上皮,。上皮向粘膜深部下陷構(gòu)成大量腺體（胃底腺、賁門(mén)腺,、幽門(mén)腺）,，它們的分泌物混合形成胃液，對(duì)食物進(jìn)行化學(xué)性消化,。粘膜在幽門(mén)處由于覆蓋幽門(mén)括約肌的表面而形成環(huán)狀的皺襞叫幽門(mén)瓣,。胃肌膜由三層平滑肌構(gòu)成，外層縱形,，中層環(huán)形，內(nèi)層斜行,，其中環(huán)形肌,，在幽門(mén)處特別增厚形成幽門(mén)括約肌。胃平滑肌細(xì)胞源自胃的平滑肌層,，細(xì)胞通過(guò)緊密連接,，進(jìn)行同步性運(yùn)動(dòng)，完成肌肉的舒縮活動(dòng),，以推動(dòng)食物前進(jìn),，完成對(duì)食物的機(jī)械性消化，并促進(jìn)化學(xué)性消化和吸收,。胃平滑肌具有肌組織的共同特性,，如興奮、自律性,、傳導(dǎo)性和收縮性,，在離體后，置于適宜的環(huán)境內(nèi),，仍能進(jìn)行良好的節(jié)律性運(yùn)動(dòng),，但其收縮很緩慢,，節(jié)律性遠(yuǎn)不如心肌規(guī)則。胃平滑肌對(duì)電刺激較不敏感,，但對(duì)于牽張,、溫度和化學(xué)刺激則特別敏感，輕微的刺激?？梢饛?qiáng)烈的收縮,。胃平滑肌的這一特性是與它所處的生理環(huán)境分不開(kāi)的，胃內(nèi)容物對(duì)平滑肌的牽張,、溫度和化學(xué)刺激是引起內(nèi)容物推進(jìn)或排空的自然刺激因素,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃平滑肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠胃平滑肌細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R208 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CD3E & CD3G Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 IGFBP5 / IGFBP-5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 CDH18 / Cadherin-18 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
食蟹猴 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 UNC5B / UNC5H2 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 IL22RA1 / IL22R 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠胃平滑肌細(xì)胞FAM50B蛋白抗體Human CMAS (N-acylneuraminate cytidylyltransferase) ELISA KIT對(duì)基-α-D-半乳糖苷
形成素2抗體（成蛋白）Human CCNYL3 (Putative cyclin-Y-like protein 3) ELISA KIT5-尿苷二二鈉鹽
脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體Human CDK16 (Cyclin-dependent kinase 16) ELISA KITDL-蘋(píng)果酸鈣
成纖維生長(zhǎng)因子17抗體Human CAND1 (Cullin-associated NEDD8-dissociated protein 1) ELISA KIT移液器P20,，單道大龍移液器P20
成纖維生長(zhǎng)因子23抗體Human CCNYL2 (Cyclin-Y-like protein 2) ELISA KIT鐵
成纖維生長(zhǎng)因子20抗體Human CWF19L1 (CWF19-like protein 1) ELISA KIT人可溶性凋亡相關(guān)因子配體（sFASL）ELISA試劑盒,
成纖維生長(zhǎng)因子19抗體Human CRELD1 (Cysteine-rich with EGF-like domain protein 1) ELISA KIT人α干擾素（IFN-α）ELISA試劑盒,IFN-α ELISA kit
成纖維生長(zhǎng)因子22抗體Human CLMP (CXADR-like membrane protein) ELISA KIT人抗肝可溶性抗原抗體（SLA）ELISA試劑盒,SLA ELISA
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