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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-19 16:09:01瀏覽次數(shù)：272
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1035 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 皮膚肥大細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1035 |
商品介紹：
名稱 皮膚肥大細(xì)胞 2.組織來源：皮膚組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人皮膚肥大細(xì)胞分離自皮膚組織,；皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細(xì)胞因子,，參與免疫調(diào)節(jié)（T細(xì)胞,、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化）。皮膚肥大細(xì)胞表達(dá)MHC分子,、B7分子,，具有APC功能。表達(dá)大量的IgE-Fc受體,，釋放過敏介質(zhì),。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣,，具有強嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞,。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素,、組織胺,、5-羥色胺，由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì),，可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)（炎癥）,。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸，使細(xì)胞多陷于崩壞,。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形,，細(xì)胞核小，呈圓形或橢圓形,，染色淺,，位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個分布于血管附近,。細(xì)胞呈圓形或卵圓形,，細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒,，均勻分布在核周圍,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人皮膚肥大細(xì)胞采用膠原酶-胰蛋白酶混合消化法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人皮膚肥大細(xì)胞經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H110 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形,、多角形 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 LIFR 基因全長ORF克隆
大鼠 KIT 基因全長ORF克隆
大鼠 SEMA4D 基因全長ORF克隆
大鼠 CD55 基因全長ORF克隆
大鼠 CNTN3 基因全長ORF克隆
大鼠 CNTN1 基因全長ORF克隆
大鼠 CD3G 基因全長ORF克隆
大鼠 CD3D 基因全長ORF克隆
大鼠 ITGB3 基因全長ORF克隆
大鼠 ITGA3 基因全長ORF克隆
皮膚肥大細(xì)胞78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Inhibitor of nuclear factor kappa-B kinase subunit epsilon
93.75-6000 pg/mL 口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法)
NT培養(yǎng)基 英文名稱：NT Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.312-20 nmol/mL ELISA Kit for Triglyceride
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human 5-oxoprolinase
78-5000 pg/mL 人孤啡肽受體(Nociceptin receptor)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 人干擾素α/β受體2(IFNAR2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人氧化(Cytochrome c oxidase subunit 3)ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Gastric triacylglycerol lipase
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human C-C motif chemokine 20
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