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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-08 16:22:01瀏覽次數(shù)：300
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X0585 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| HTR-8/Svneo (絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0585 |
商品介紹：
名稱 HTR-8/Svneo (絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞) 別稱HTR-8/SV neo; HTR-8/SV-neo; HTR8/SVneo; HTR8svn 年齡（性別）女,；6-12周胚胎 組織來源胎盤 生長特性貼壁細(xì)胞 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 背景描述The HTR-8/SVneo cell line was derived by transfecting the cells that grew out of chorinic villi explants of human first-trimester placenta with the gene encoding for simian virus 40 large T antigen. 生物安全等級(jí)2 生長培養(yǎng)基RPMI-1640＋5% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:3-1:5 推薦換液頻率2~3次/周 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5% 溫度：37℃ 致瘤性No (tested in soft agar and nude mice). 抗原表達(dá)情況cytokeratin-7+; insulin-like growth factor (IGF)-II+; NDOG-5 (placental alkaline phosphatase (PLAP) antibody) +; proliferating cell nuclear antigen (PCNA)+; human leukocyte antigen framework antigen (W6/32)+; integrin subunits alpha 1, alpha 3, alpha |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
KDSR 基因全長ORF克隆
BTN3A2 基因全長ORF克隆
UACA 基因全長ORF克隆
TNKS2 基因全長ORF克隆
ITGB4 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆
EMR3 基因全長ORF克隆
RNASET2 基因全長ORF克隆
DCX 基因全長ORF克隆
GREM1 基因全長ORF克隆
CSNK2A1 基因全長ORF克隆
HTR-8/Svneo (絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞)12.5-800 ng/mL ELISA Kit for Human Histatin-3
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Syndecan-1
0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Tubulin beta-3 chain
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Aminopeptidase Q
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Cathelicidin antimicrobial peptide
0.156-10 ng/mL 人ENTPD1蛋白(NTPDase 1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人β抑制蛋白2(ARRB2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human E3 ubiquitin-protein ligase HUWE1
阪崎桿菌顯色培養(yǎng)基 英文名稱：Enterobacter Sakazakii Chromogenic Medium 產(chǎn)品規(guī)格：1000ml
0.156-10 ng/mL 人輔肌動(dòng)蛋白α3(ACTN3)ELISA試劑盒
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