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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠骨髓單個核細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1423 |
商品介紹：
名稱 大鼠骨髓單個核細胞 2.組織來源：骨髓 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠骨髓單個核細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織,，位于身體的許多骨骼內,。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體,，包括細菌,、病毒等；某些淋巴細胞能抗體,。因此,，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨（如肱骨,、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織,，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,，稱為紅骨髓。出生時,，紅骨髓充滿全身骨髓腔,，隨著年齡增大，脂肪細胞增多,，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞,，包括淋巴細胞和單核細胞,。注意這里是（mononuclear cell）單個核細胞，而不是（Monocyte）單核細胞,。單個核細胞的體積,、形態(tài)和比重與骨髓其他細胞不同，利用一定比例聚蔗糖和泛影酸鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,，使一定密度的細胞按相應密度梯度分布,，可將各種血細胞與單個核細胞分離。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠骨髓單個核細胞采用取骨髓,、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的大鼠骨髓單個核細胞經(jīng)過檢測,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R322 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性半貼壁半懸浮 細胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
小鼠 KIRREL3 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IL-24 / Interleukin-24 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
OMG / OMGP (aa 1-420) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
OMG / OMGP (aa 1-416) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FCGRT & B2M Heterodimer 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD32a / FCGR2A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
甲型流感 H5N1 (A/whooper swan/Mongolia/244/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 FCAR / CD89 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CST1 / Cystatin-1 / Cystatin-SN 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠骨髓單個核細胞Halomonas sp.二氫辣椒素檢測試劑盒
Marinobacter sp.辣椒素檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes抗氧化檢測試劑盒
Microbacterium sp.法尼基焦合檢測試劑盒
Halorubrum sp.角鯊烯單加氧;鯊烯環(huán)氧檢測試劑盒
Halorubrum californiensisβ-香樹脂合成檢測試劑盒
Halorubrum sp.鯊烯合檢測試劑盒
Halorubrum sp.抗性淀粉檢測試劑盒
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