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腹膜間皮細胞

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更新時間:2022-04-22 14:30:46瀏覽次數(shù):295

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1225 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
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細(紅)敏感性DISC彌散(KIRBY-BAUER)檢測試劑盒 2

詳細介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

腹膜間皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1225

商品介紹:

名稱    腹膜間皮細胞 

2.組織來源:腹膜組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

腹膜間皮細胞分離自腹膜組織,;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,主要由間皮細胞構(gòu)成,,藉由結(jié)締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內(nèi)的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,,減輕臟器間的摩擦,。腹腔臟器的血液、淋巴和神經(jīng)組織經(jīng)由腹膜與外界相連,;腹膜也具有吸收撞擊保護內(nèi)臟的效果,。腹膜(peritoneum)為全身面積最大、配布最復(fù)雜的漿膜,,由皮及少量結(jié)締組織構(gòu)成,,薄而光滑,呈半透明狀,。襯于腹,、盆腔壁內(nèi)表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層;覆蓋腹,、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù)、移行,,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity),。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內(nèi)有少量漿液,,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜間皮細胞屬于上皮組織中的單層扁平上皮,,是覆蓋于腹膜表面的一層細胞,。間皮細胞是構(gòu)成間皮的細胞,正常大小約為15-25微米,,細胞常呈圓形或者卵圓形,。其功用是提供潤滑,使器官與器官,、器官與胸膜與腹膜間都能得到良好的保護,,不會互相磨損受傷。而間皮所的潤滑和保護作用就是靠間皮細胞所分泌的物質(zhì)來達成,,分泌物多半為細胞外基質(zhì),、玻尿酸類物質(zhì)。

5.方法簡介:

實驗室分離的人腹膜間皮細胞采用混合膠原酶消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的人腹膜間皮細胞經(jīng)PCKVimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H180

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)成纖維細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法,;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,,易碎,,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二,、免疫熒光鑒定:

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;

2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;

5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;

6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

 Transferrin / TF ELISA配對抗體

甲型流感 H9N2 血凝素 (Hemagglutinin / HA) ELISA配對抗體

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類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 p24 / Capsid Protein p24 ELISA配對抗體

 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A ELISA配對抗體

 Endoglin / CD105 / ENG ELISA配對抗體

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 IL17RA / CD217 ELISA配對抗體

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Clostridium acetobutylicum草膦乙酰轉(zhuǎn)移檢測試劑盒

Enterobacter cloacae苯檢測試劑盒

Micrococcus luteus苯檢測試劑盒

Micrococcus luteus,;蛋白檢測試劑盒

Micrococcus luteus鳥苷酸激檢測試劑盒

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