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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 08:35:45瀏覽次數(shù)：241
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1061 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1061 |
商品介紹：
名稱(chēng) 大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞 2.組織來(lái)源：眼球 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞分離自眼球虹膜組織,；虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分,，屬于眼球中層,，位于血管膜的最前部,；在睫狀體前方虹膜,，中心有一圓形開(kāi)口,，稱(chēng)為瞳孔,，猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈,，內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時(shí)，虹膜會(huì)收蹜,，只使一小束光線穿透瞳孔,，進(jìn)入眼睛；當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中,，虹膜就會(huì)往后退縮,，使瞳孔變大，讓更多的光線進(jìn)入眼睛,，多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜,。虹膜色素上皮細(xì)胞（IPE）是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一，位于虹膜組織的后面,，和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（RPE）同樣起源于神經(jīng)外胚葉層,，可能具有相似的生物學(xué)功能，因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R118 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí),， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過(guò)大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無(wú)菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 TIMP1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 TEK / Tie2 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 PRLR 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 APCS / SAP 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CXCL5 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 LCN2 / NGAL 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠 CXCL10 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 CD31 / PECAM1 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 FCGRT 基因全長(zhǎng)ORF克隆
食蟹猴 YWHAB 基因全長(zhǎng)ORF克隆
大鼠虹膜色素上皮細(xì)胞7.8-500 pg/mL ELISA Kit for Human C-C chemokine receptor type 1
0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human HLA class I histocompatibility antigen, B-27 alpha chain
馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：Potato Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人二核苷激A(NDK A)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 禽傳染性支氣管炎病毒(AIBV)核酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR法)
1/2MS培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：1/2MS Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
1.25-80 ng/mL ELISA Kit for Human Sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3
0.625-40 ng/mL 人層粘連蛋白β2(LAMβ2)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Protein ERGIC-53
YPD液體培養(yǎng)基 英文名稱(chēng)：YPD Broth 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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