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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2025-02-16 17:49:01瀏覽次數(shù)：288
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1169 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠腹腔巨噬細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1169 |
商品介紹：
名稱 大鼠腹腔巨噬細(xì)胞 2.組織來源：腹膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠腹腔巨噬細(xì)胞分離自腹腔,；腹腔，即軀干腹部的腔,，內(nèi)襯腹膜,，由體壁、橫膈膜和盆底圍成,，其內(nèi)容納胃,、肝、膽囊,、脾臟,、胰、腎臟,、腸,、闌尾,、膀胱、泌尿系和婦科(子宮,、附件)等其他內(nèi)臟器官,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞，有多種功能,，是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得,，便于培養(yǎng),，并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,，在條件適宜下可生活2-3周,，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存,。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,，源自單核細(xì)胞，而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞,。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,，在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),，并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,，令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。巨噬細(xì)胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點(diǎn)問題之一,；腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬,、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能,。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腹腔巨噬細(xì)胞采用反復(fù)往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腹腔巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R158 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)巨噬細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí),， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
MYC 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
JAK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
VEGFR3 / FLT4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
大鼠 IL2RG 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
小鼠 DLL1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
小鼠 CXCR2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
SR-A / MSR1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶Myc標(biāo)簽
METAP2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
GM-CSF 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
CAV1 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
大鼠腹腔巨噬細(xì)胞Metschnikowia pulcherrima分泌成分檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces arboricolus分泌型卷曲相關(guān)蛋白1檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces arboricolus分泌型球蛋白A檢測(cè)試劑盒
Saccharomyces arboricolus封閉蛋白1檢測(cè)試劑盒
Rhodotorula sp.復(fù)制蛋白A檢測(cè)試劑盒
Cryptococcus sp.鈣蛋白檢測(cè)試劑盒
Pichia sp.鈣非依賴型磷脂A2檢測(cè)試劑盒
Cryptococcus sp.鈣離子檢測(cè)試劑盒
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