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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 外周血淋巴細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1307 |
商品介紹：
名稱 外周血淋巴細(xì)胞 2.組織來源：血液組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 人外周血淋巴細(xì)胞分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液,，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,，再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞，我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,，在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計(jì)劃中提出外周血這一新概念,。淋巴細(xì)胞（lymphocyte）是白細(xì)胞的一種，是體積最小的白細(xì)胞,。其由淋巴器官產(chǎn)生,，主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中，是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分,，是淋巴系統(tǒng)幾乎全部免疫功能的主要執(zhí)行者,，是對抗外界感染和監(jiān)控體內(nèi)細(xì)胞變異的一線“士兵"。淋巴細(xì)胞是一類具有免疫識別功能的細(xì)胞系,，按其發(fā)生遷移,、表面分子和功能的不同，可分為T淋巴細(xì)胞（又名T細(xì)胞）、B淋巴細(xì)胞（又名B細(xì)胞）和自然殺傷（NK）細(xì)胞,。T細(xì)胞和B細(xì)胞都是抗原特異性淋巴細(xì)胞,，它們的最初來源是相同的，都來自造血組織,。T淋巴細(xì)胞隨血循環(huán)到胸腺,，在胸腺激素等的作用下成熟，而B細(xì)胞在骨髓中分化成熟,。當(dāng)受抗原刺激后，T淋巴細(xì)胞即轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞,，再分化為致敏T淋巴細(xì)胞,，參與細(xì)胞免疫，其免疫功能主要是抗胞內(nèi)感染,、瘤細(xì)胞與異體細(xì)胞等,；而B淋巴細(xì)胞是先轉(zhuǎn)化為漿母細(xì)胞，再分化為漿細(xì)胞,，產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白（抗體）,，參與體液免疫，其功能是產(chǎn)生抗體,，提呈抗原,，以及分泌細(xì)胞內(nèi)因子參與免疫調(diào)節(jié)；NK細(xì)胞不依賴抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng),，具有殺傷靶細(xì)胞的作用,。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血淋巴細(xì)胞采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的人外周血淋巴細(xì)胞經(jīng)過檢測，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H211 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性懸浮 細(xì)胞形態(tài)圓形 傳代特性不增殖,；不傳代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
食蟹猴 EphB1 / EPHT2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 AMY2A / Alpha-amylase 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CSF1R / MCSF Receptor / CD115 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 PDGFRa / CD140a 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 Layilin / LAYN 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 B7-H3 / CD276 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD8A / Lyt2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 ALCAM / CD166 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL18R1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL17RA / IL17R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
外周血淋巴細(xì)胞烯酸異癸酯 98%,含70-100ppm對苯二酚穩(wěn)定劑異丁 99%(劇品)Anti-phospho-Bim(Ser69) 化死亡調(diào)解子抗體
2-丁酮酸 97%異丁 Standard for GC, ≥99.5% (GC)Anti-BIRC5/Survivin variant 凋亡抑制因子5抗體
亞油酸 99%聚烯酰 非離子型,，分子量：200萬-1400萬Anti-BK channel BK通道蛋白抗體
1,2,3,4,5,6-六氯環(huán)己烷 分析標(biāo)準(zhǔn)品三苯酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC)Anti-BKCa channels 鈣激活通道蛋白抗體
1,2,3,4,5,6-六氯環(huán)己烷 97%三苯酯 CPAnti-Bmi1/PCGF4 組蛋白相關(guān)Bmi1抗體
DL-乳酸鋰 97%三苯酯 98%Anti-BLNK B連接蛋白抗體
，雞蛋白 40000U/mg酚酯 99%Anti-Phospho-BLNK(Tyr96) 化T連接蛋白抗體
亞麻酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品 ,≥99% (GC)環(huán)胞霉素A 98%Anti-BMP2 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2抗體
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