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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠口腔上皮細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1355 |
商品介紹：
名稱 小鼠口腔上皮細胞 2.組織來源：口腔黏膜組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠口腔上皮細胞分離自口腔黏膜組織,；口腔上皮細胞是一種上皮細胞,，呈扁平,、多邊形,，形狀不規(guī)則?？谇桓鞅诙加叙つじ采w,，口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部。上皮的垂直切面上,，細胞形狀不一,。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細胞,，部分子細胞向淺層移動,。基底層以上是數(shù)層多邊形細胞,，再上為幾層梭形或扁平細胞,。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀，基底層細胞能不斷分裂增生,，以補充表層衰老或損傷脫落的細胞,。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng),。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠口腔上皮細胞先中性蛋白酶消化,、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠口腔上皮細胞經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M233 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大?。?/span>
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液,，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s,，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5,、PBS沖洗細胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
TETHERIN / BST2 / CD317 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 GP1BB / CD42c 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 NCR1 / NK-p46 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 GITR / TNFRSF18 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PNLIP 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
Gastric intrinsic factor / GIF 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IZUMO1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
B7-H5 / Gi24 / VISTA 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CRELD1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠口腔上皮細胞激活素受體樣激1抗體Human LEF1 ELISA Kit現(xiàn)貨L-
激活素A受體1B抗體Human LDHAL6A ELISA KitN-乙酰-L-谷氨酰
化雄受體抗體Human LCTL ELISA KitL-高苯乙酯鹽酸鹽
化A-Raf抗體Human LDB1 ELISA KitD-天冬酰一水物
?；拾泵擋?/span>2抗體Human LDLRAD1 ELISA Kit1, 5-O-二咖啡?？鼘幩?1,5-Dicaffeoylqunic acid
脂肪特異性粘附分子抗體Human LDB3 ELISA Kit人分泌性白蛋白抑制因子（SLPI）ELISA試劑盒,
腺相關(guān)病5抗體Human LEF1 ELISA Kit人嗜酸性粒陽離子蛋白（ECP）ELISA試劑盒,
腺苷酸活化蛋白激γ3抗體Human LDOC1 ELISA Kit人纖維介素蛋白（fgl2）ELISA試劑盒,
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