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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-18 16:30:19瀏覽次數(shù)：253
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0909 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0909 |
商品介紹：
名稱 大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞 2.組織來源：膀胱組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 大鼠膀胱上皮細(xì)胞分離自膀胱組織,；膀胱是一個儲尿器官,，在哺乳類動物，它是由平滑肌組成的一個囊形結(jié)構(gòu),，位于骨盆內(nèi),，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,，可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成，由內(nèi)向外為黏膜層,、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成，稱為逼尿肌,，逼尿肌收縮,，可使膀胱內(nèi)壓升高，壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,，形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,，防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）,、肌肉層（逼尿肌、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織）,。其主要作用有：①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分；②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子,；③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞,，進(jìn)而影響腎臟病變。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R058 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)上皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠 IL1F1 / IL1α 基因全長ORF克隆
小鼠 APCS / SAP 基因全長ORF克隆
小鼠 OSM 基因全長ORF克隆
小鼠 NRTN 基因全長ORF克隆
小鼠 CD27 / TNFRSF7 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆
小鼠 CCL25 基因全長ORF克隆
小鼠 IL17D 基因全長ORF克隆
小鼠 CCL28 基因全長ORF克隆
小鼠 RTN4R / NOGOR 基因全長ORF克隆
小鼠 NDP / EVR2 基因全長ORF克隆
大鼠膀胱移行上皮細(xì)胞含青TSA平板 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：9cm*10/包
改良Skirrow瓊脂添加劑 英文名稱：Modified Skirrow Agar Additives 產(chǎn)品規(guī)格：1ml*5支
31.2-2000 pg/mL 人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人孕酮-絨毛膜雌激素受體(LH/CG-R)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Glucagon-like peptide 1 receptor
0.156-10 ng/mL 人同種異體移植炎癥因子1(AIF-1)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人CD276抗原(CD276 antigen)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 人顆粒溶素(Granulysin)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Sugar transporter SWEET1
0.156-10 ng/mL 人淋巴細(xì)胞抗原6復(fù)合位點蛋白G6F ELISA試劑盒
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