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小鼠晶狀體上皮細胞

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更新時間:2022-04-22 08:39:06瀏覽次數(shù):239

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1063 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
小鼠晶狀體上皮細胞的相關(guān)*:組織5-焦甲羥戊酸脫羧(mevalonate 5-pyrophosphate decarboxylase)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
血液5-焦甲羥戊酸脫羧(mevalonate 5-pyrophosphate decarboxylase)活性比色法定量檢測試劑盒 20次
細胞異戊二烯焦異構(gòu)(isopentenyl pyrophosphate isome

詳細介紹

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時動作要輕,;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠晶狀體上皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1063

商品介紹:

名稱    小鼠晶狀體上皮細胞  

2.組織來源:晶狀體組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

小鼠晶狀體上皮細胞分離自晶狀體組織;晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,,僅含有上皮細胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細胞*分開,;因而,,晶狀體上皮細胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾,,又不受其它類型細胞如成纖維細胞的污染,保證了培養(yǎng)中細胞成分的單一性,。晶狀體上皮細胞主要負責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,,包括電解質(zhì)和液體的輸送,。在正常的發(fā)育過程中,,晶狀體上皮細胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細胞,,并最終失去細胞核和其它的細胞器,。研究表明,晶狀體上皮細胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,,包括表皮生長因子和胰島素等。細胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,,呈單層生長、連成膜狀,。晶狀體上皮細胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細胞,,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),,體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。

5.方法簡介:

實驗室分離的小鼠晶狀體上皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的小鼠晶狀體上皮細胞經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-M119

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1-2

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%CO2,,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,, 以防止冰晶過大,,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化,;

4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

二、免疫熒光鑒定:

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;

2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;

6、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

食蟹猴 THBS1 基因全長ORF克隆

食蟹猴 CD155 / PVR 基因全長ORF克隆

食蟹猴 Thrombopoietin / THPO 基因全長ORF克隆

食蟹猴 SFTPD 基因全長ORF克隆

食蟹猴 CRP 基因全長ORF克隆

食蟹猴 TP53 基因全長ORF克隆

大腸桿 FABI 基因全長ORF克隆

大鼠 Neuropilin-1 基因全長ORF克隆

大鼠 EPO 基因全長ORF克隆

大鼠 PDGFB 基因全長ORF克隆

小鼠晶狀體上皮細胞Korser氏肉湯 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Aryl hydrocarbon receptor nuclear translocator

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Transcription termination factor 2

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein C-I

0.39-25 ng/mL 人腎母細胞瘤蛋白1相互作用蛋白(WTIP)ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mL 腎上腺素(Epinephrine)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Cyclin-dependent kinase 2

1.25-80 ng/mL 百日咳桿菌(BP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

0.625-40 ng/mL 口蹄疫病毒O亞型(FMDV-O)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

0.078-5 ng/mL ELISA Kit for Human Kynurenine/alpha-aminoadipate aminotransferase, mitochondrial

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