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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 10:15:20瀏覽次數(shù)：223
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1113 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 食管癌組織源細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1113 |
商品介紹：
名稱 食管癌組織源細胞 2.組織來源：食管癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人食管癌組織源細胞分離自癌組織,；癌（cancer）是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,，是惡性腫瘤中最常見的一類,。相對應(yīng)的，起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤,。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,，如腎母細胞瘤、惡性畸胎瘤等,。一般人們所說的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤,。癌癥具有細胞分化和增殖異常,、生長失去控制、浸潤性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征,，其發(fā)生是一個多因子,、多步驟的復(fù)雜過程，分為致癌,、促癌,、演進三個過程，與吸煙,、感染,、職業(yè)暴露、環(huán)境污染,、不合理膳食,、遺傳因素密切相關(guān)。癌細胞,，是一種變異的細胞,，是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細胞與正常細胞不同,，有無限增殖,、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點，能夠無限增殖并破壞正常的細胞組織,。癌細胞除了分裂失控外（能進行多極分裂）,，還會局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種,。 5.方法簡介： 實驗室分離的癌組織源細胞采用膠原酶消化,、經(jīng)Percoll離心純化制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人食管癌組織源細胞經(jīng)檢測,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H138 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些,。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
GM-CSF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
bFGF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽 (密碼子優(yōu)化)
aFGF / FGF1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽 (密碼子優(yōu)化)
aFGF / FGF1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽 (密碼子優(yōu)化)
CD66e / CEACAM5 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
狗 EGFR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
GSTA1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
BRAF 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
EpCAM / TROP1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 基因全長ORF克隆 (表達載體)(密碼子優(yōu)化), 無標簽
食管癌組織源細胞瓊脂培養(yǎng)基O 英文名稱：Agar medium O(Baird-Parker agar) 產(chǎn)品規(guī)格：250g
0.156-10 ng/mL 人白介素36A(IL-36A)ELISA試劑盒
動力-硝酸鹽培養(yǎng)基（B法） 英文名稱：Power - nitrate medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
62.5-4000 pg/mL 人髓系細胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1（TREML1/TLT-1）ELISA試劑盒
12.5-800 U/mL 人UL-16結(jié)合蛋白-2（ULBP-2）ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL 人載脂蛋白B(Apo-B)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL 人細胞角蛋白1(KRT-1)ELISA試劑盒
雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液（含小倒管） 英文名稱：Double Lactose Peptone Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10ml*20支/包
39-2500 pg/mL ELISA Kit for Human Troponin I, slow skeletal muscle
0.156-10 ng/mL 轉(zhuǎn)基因植物cry1A基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
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