 |
上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
|
—— 銷售熱線 ——
18321818584 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-22 16:11:48瀏覽次數(shù)：239
聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,，謝謝!
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1293 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),，懸浮細(xì)胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 胃癌組織成纖維細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1293 |
商品介紹：
名稱 胃癌組織成纖維細(xì)胞 2.組織來源：胃癌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 人胃癌組織源成纖維細(xì)胞分離自患有胃癌病人的胃癌組織,；胃癌（gastric carcinoma）是起源于胃黏膜上皮的惡性腫瘤，在我國(guó)各種惡性腫瘤中發(fā)病率居,，胃癌可發(fā)生于胃的任何部位,，其中半數(shù)以上發(fā)生于胃竇部，胃大彎,、胃小彎及前后壁均可受累,，絕大多數(shù)胃癌屬于腺癌。在胃癌侵襲和轉(zhuǎn)移的過程中,，涉及諸多復(fù)雜的過程,，如細(xì)胞外基質(zhì)的硬化和降解、新生血管的形成等,，而這些過程會(huì)直接或間接的引起腫瘤微環(huán)境（Tumor mircoenvironment）的改變,。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細(xì)胞生存的外部環(huán)境，由不同種類的非腫瘤性的細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（Extracellular matrix,，ECM）構(gòu)成,，包括纖維細(xì)胞，免疫細(xì)胞,，內(nèi)皮細(xì)胞,，間充質(zhì)干細(xì)胞等，腫瘤細(xì)胞通過調(diào)控這些間質(zhì)細(xì)胞,，創(chuàng)造出有利于自身侵襲轉(zhuǎn)移的條件,，從而使得腫瘤得到進(jìn)展。越來越多的證據(jù)表明,，腫瘤微環(huán)境的改變?cè)谀[瘤進(jìn)展中扮演著重要的角色,。在腫瘤微環(huán)境中，研究最多也是最主要的間質(zhì)細(xì)胞是腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）,。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞樣細(xì)胞演化而來,。胃癌組織源成纖維細(xì)胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯,。剛分離的胃癌組織源成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細(xì)胞基本貼壁*，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán),；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦,、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細(xì)胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的人胃癌組織成纖維細(xì)胞采用混合膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的人胃癌組織成纖維細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-H206 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右,；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%；CO2,，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大,，造成細(xì)胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶）,，混懸10s,，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3,、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二,、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3,、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min,，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h,；
6、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lck Kinase 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
CCNA1 / Cyclin-A1 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
甲型流感 H1N1 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
S100A9 / CAGB / p14 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
S100A8 / CAGA / p8 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
TGM2 / Transglutaminase 2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
CNTFR / CNTFR-alpha 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
ACBD6 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
S100A6 / CACY 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) (變性)
胃癌組織成纖維細(xì)胞CD318抗體Human SAT1(Diamine acetyltransferase 1) ELISA Kit三糖鐵瓊脂（TSI）
著絲粒蛋白B抗體Human SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) ELISA Kit產(chǎn)芽孢肉湯 用于產(chǎn)氣莢膜梭的產(chǎn)芽孢培養(yǎng)
1號(hào)染色體開放閱讀框111抗體Human IFNA2(Inteferon alpha 2a) ELISA Kit皰肉牛肉粒 加入皰肉基礎(chǔ)中,，配成皰肉培養(yǎng)基
19號(hào)染色體開放閱讀框80抗體Human NENF(Neudesin) ELISA KitCBZ-L-焦谷
半胱雙加氧1抗體Human SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) ELISA KitBOC-L-天冬酰
膠原蛋白11A2抗體Human beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) ELISA Kit芴甲氧羰基-O-叔丁基-L-
CUL4B蛋白抗體Human Wnt6(Protein Wnt-6) ELISA Kit大豆苷 Daidzin
1號(hào)染色體開放閱讀框103抗體Human NEXN(Nexilin) ELISA Kit鉤吻素子 Koumine
化工儀器網(wǎng)
化工儀器網(wǎng)