產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
大鼠腎臟巨噬細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1091 |
商品介紹:
名稱 大鼠腎臟巨噬細(xì)胞 2.組織來源:腎組織 3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介: 大鼠腎臟巨噬細(xì)胞分離自腎組織,;腎臟是機(jī)體的重要器官,,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物,、毒物,,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),,如葡萄糖、蛋白質(zhì),、氨基酸,、鈉離子、鉀離子,、碳酸氫鈉等,,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡,。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素,、活性D3,、前列腺素、激肽等,,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官,。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,,使新陳代謝得以正常進(jìn)行,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,,是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象。巨噬細(xì)胞較易獲得,,便于培養(yǎng),,并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,,在條件適宜下可生活2-3周,,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存,。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞,。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),,并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,,令其對(duì)病原體作出反應(yīng)。 5.方法簡介: 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎臟巨噬細(xì)胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測(cè): 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腎臟巨噬細(xì)胞經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息: 培養(yǎng)基含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R129 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)巨噬細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群 培養(yǎng)條件氣相:空氣,,95%;CO2,,5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法,?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下,, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存,。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,,造成細(xì)胞大量死亡,,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些,。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),,而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法,;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理,;
3.蓋玻片非常薄,,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕,;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率,;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一,、分離與培養(yǎng):
1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,將成1mm3左右大小,;
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織*被消化;
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二,、免疫熒光鑒定:
1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
PCSK2 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶His標(biāo)簽
PGA4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PGA4 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
SLCO1B3 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
FTO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
FTO 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
RHOA 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
PPARGC1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 無標(biāo)簽
PPARGC1A 基因全長ORF克隆 (表達(dá)載體), 帶FLAG標(biāo)簽
大鼠腎臟巨噬細(xì)胞78-5000 pg/mL 人過氧化還原4(PRDX4)ELISA試劑盒
MC培養(yǎng)基(不含瓊脂) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g
39-2500 pg/mL 人不均一核核糖核蛋白K(HNRPK)ELISA試劑盒
0.78-50 ng/mL ELISA Kit for Human Mesothelin
78-5000 pg/mL 人神經(jīng)營養(yǎng)的激1型受體 (NTRK1) ELISA試劑盒
31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Matrix metalloproteinase-14
78-5000 pg/mL 人不典型蛋白C13orf33(Uncharacterized protein C13orf33)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Apolipoprotein C-II
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Tumor necrosis factor ligand superfamily member 8
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Vascular endothelial growth factor C