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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2025-02-16 14:58:43瀏覽次數(shù)：257
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1427 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎，取放蓋玻片時動作要輕,；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大,，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干,。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 大鼠腓腸肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1427 |
商品介紹：
名稱 大鼠腓腸肌細胞 2.組織來源：骨骼肌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 大鼠腓腸肌細胞分離自小腿肌肉組織,；腓腸肌位于小腿后面的皮下，是一個淺表的肌肉,，當人體站立時,，可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉,，有內(nèi),、外二頭,，內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起，外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端,，在二頭的深面各有一滑膜囊,。腓腸肌的二肌腹增大，在腘窩下角彼此鄰近,，所成夾角多為25°～30°,，此肌下行與比目魚肌移行為跟腱，止于跟骨結(jié)節(jié),。腓腸肌的動脈發(fā)自腘動脈,、靜脈與動脈伴行，注入腘靜脈或小隱靜脈,。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng),。包括內(nèi)、外側(cè)肌神經(jīng),。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上,，直立時，腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關(guān)節(jié),，并調(diào)節(jié)小腿和足的位置,。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕，可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn),。腓腸肌還可影響足的縱弓,，該肌癱瘓或時，足縱弓將加深,。該肌由脛神經(jīng)支配，股骨髁上骨折時,，因腓腸肌收縮遠側(cè)端常自后移位,。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細胞屬于骨骼肌細胞的一種,，骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種，約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官,，有豐富的血管,、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,，進行隨意運動,。肌肉可根據(jù)共形狀、大小,、位置,、起止點、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌、三角肌,、梨狀肌等,。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細胞膜下方,。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維,。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺,，而暗帶染色較深,。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線,。明帶中間,，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,，叫做一個肌節(jié),。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形、居中,；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。 5.方法簡介： 實驗室分離的大鼠腓腸肌細胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的大鼠腓腸肌細胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-R326 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大,，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些,。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化；
4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
CDON / CDO 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
MST1R / CD136 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SELL / CD62L / L-selectin 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD46 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD40L / CD154 / TNFSF5 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PDGFRB / CD140b 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ROBO4 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD59 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD16a / FCGR3A 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 ICAM1 / CD54 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠腓腸肌細胞Alishewanella fetalis25羥基3檢測試劑盒
Alishewanella fetalis3,4二羥基檢測試劑盒
Alishewanella fetalis4-羥基壬烯檢測試劑盒
Alishewanella fetalis5羥基乙酸檢測試劑盒
Alishewanella fetalis5羥色檢測試劑盒
Alishewanella fetalis5-羥色受體7檢測試劑盒
Alishewanella fetalis6酮前列腺素F1α檢測試劑盒
Alishewanella fetalis8羥基脫氧鳥苷檢測試劑盒
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