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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-22 08:41:29瀏覽次數(shù)：220
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1065 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 皮層神經(jīng)元細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1065 |
商品介紹：
名稱 皮層神經(jīng)元細胞 2.組織來源：腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人皮層神經(jīng)元細胞分離自腦皮層組織,；皮層神經(jīng)元細胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位,。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞，它由細胞體和細胞突起構(gòu)成,。在長的軸突上套有一層鞘,，組成神經(jīng)纖維，它的末端的細小分支叫做神經(jīng)末梢,。細胞體位于腦,、脊髓和神經(jīng)節(jié)中，細胞突起可延伸至全身各器官和組織中,。細胞體是細胞含核的部分,，其形狀大小有很大差別，直徑約4-120微米,。核大而圓,，位于細胞中央,，染色質(zhì)少，核仁明顯,。細胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),，還有許多神經(jīng)元纖維。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分,，又可分為樹突和軸突,。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突，可以接受刺激并將興奮傳入細胞體,。每個神經(jīng)元只有一個軸突,，可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織，如肌肉或腺體,。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細胞之一,，是大腦進行功能活動調(diào)節(jié)的基本單位，參與動物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程,。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁,、伸出突起開始；突起逐漸增多,，而后突起進一步增多并逐漸成網(wǎng),，同時細胞胞體增大，周邊光暈明顯,。10-12d細胞最為豐滿,，隨后神經(jīng)元開始裂解，突起逐漸減少,，細胞已退化變性,，輪廓模糊，光暈消失,，細胞變形,。 5.方法簡介： 實驗室分離的人皮層神經(jīng)元細胞采用胰蛋白酶消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的人皮層神經(jīng)元細胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement,、Penicillin,、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-H120 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)神經(jīng)元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣,，95%,；CO2，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織*被消化,；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min,，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
5,、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),；
二、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,；
3、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,；
4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h；
6,、用PBS沖洗3次,，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 CRP 基因全長ORF克隆
大鼠 CystatinC / CST3 基因全長ORF克隆
大鼠 CXCL1 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL5 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL4 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL20 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL2 / MCP-1 基因全長ORF克隆
大鼠 BOK 基因全長ORF克隆
大鼠 CD62E / E-Selectin 基因全長ORF克隆
大鼠 MSTN 基因全長ORF克隆
皮層神經(jīng)元細胞39-2500 pg/mL ELISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K
含225mlGN增菌液均質(zhì)袋 英文名稱：GN Enrichment Broth 產(chǎn)品規(guī)格：10個/包
0.156-10 ng/mL 人沉默調(diào)節(jié)蛋白4(SIRT4)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-2 receptor subunit alpha
0.312-20 ng/mL 人心房利鈉肽受體1(ANPRA)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 水泡病毒(SVDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.625-40 ng/mL 人含Patatin磷脂域包含蛋白2(PNPL2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Integrin alpha-5
LB瓊脂（lennox） 英文名稱： 產(chǎn)品規(guī)格：250g
Casman瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Casman Agar Medium 產(chǎn)品規(guī)格：250g
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