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詳細介紹
冷凍保存細胞之方法,？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存,。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存,。*-20 ℃不可超過1 小時,， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡,，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,，惟存活率稍微降低一些。
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 皮層神經元細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1065 |
商品介紹：
名稱 皮層神經元細胞 2.組織來源：腦組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人皮層神經元細胞分離自腦皮層組織,；皮層神經元細胞是構成中樞神經系統(tǒng)結構和功能的基本單位,。神經元是具有長突觸(軸突)的細胞，它由細胞體和細胞突起構成,。在長的軸突上套有一層鞘，組成神經纖維,，它的末端的細小分支叫做神經末梢,。細胞體位于腦、脊髓和神經節(jié)中,，細胞突起可延伸至全身各器官和組織中,。細胞體是細胞含核的部分，其形狀大小有很大差別,，直徑約4-120微米,。核大而圓，位于細胞中央,，染色質少,，核仁明顯。細胞質內有斑塊狀的核外染色質,，還有許多神經元纖維,。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分，又可分為樹突和軸突,。每個神經元可以有一或多個樹突,，可以接受刺激并將興奮傳入細胞體。每個神經元只有一個軸突,，可以把興奮從胞體傳送到另一個神經元或其他組織,，如肌肉或腺體,。皮質神經元是大腦皮質的主要組成細胞之一，是大腦進行功能活動調節(jié)的基本單位,，參與動物多種中樞神經系統(tǒng)疾病的病理過程,。通過形態(tài)學觀察顯示神經元從貼壁、伸出突起開始,；突起逐漸增多,，而后突起進一步增多并逐漸成網，同時細胞胞體增大,，周邊光暈明顯,。10-12d細胞最為豐滿，隨后神經元開始裂解,，突起逐漸減少,，細胞已退化變性，輪廓模糊,，光暈消失,，細胞變形。 5.方法簡介： 實驗室分離的人皮層神經元細胞采用胰蛋白酶消化法,、神經元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結合化學試劑抑制法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的人皮層神經元細胞經β-Tubulin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等 產品貨號CM-H120 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)神經元細胞樣 傳代特性屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%,；CO2,，5% |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),，懸浮細胞可使用滴片法,；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理,；
3．蓋玻片非常薄,，易碎,，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,，可以使用較大的培養(yǎng)皿,，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率,；
5．如果細胞貼壁生長能力較差,，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一,、分離與培養(yǎng)：
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，將成1mm3左右大小,；
2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s，置37℃消化10 min后,，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化,；
4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min,，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶,，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二,、免疫熒光鑒定：
1,、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基,，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,；
2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min，然后在室溫條件下,，用4% BSA封閉細胞30min,；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,；
5、PBS沖洗細胞3次,，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h,；
6,、用PBS沖洗3次，每次10min,，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。
大鼠 CRP 基因全長ORF克隆
大鼠 CystatinC / CST3 基因全長ORF克隆
大鼠 CXCL1 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL5 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL4 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL20 基因全長ORF克隆
大鼠 CCL2 / MCP-1 基因全長ORF克隆
大鼠 BOK 基因全長ORF克隆
大鼠 CD62E / E-Selectin 基因全長ORF克隆
大鼠 MSTN 基因全長ORF克隆
皮層神經元細胞39-2500 pg/mL ELISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K
含225mlGN增菌液均質袋 英文名稱：GN Enrichment Broth 產品規(guī)格：10個/包
0.156-10 ng/mL 人沉默調節(jié)蛋白4(SIRT4)ELISA試劑盒
78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-2 receptor subunit alpha
0.312-20 ng/mL 人心房利鈉肽受體1(ANPRA)ELISA試劑盒
0.312-20 ng/mL 水泡病毒(SVDV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)
0.625-40 ng/mL 人含Patatin磷脂域包含蛋白2(PNPL2)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Integrin alpha-5
LB瓊脂（lennox） 英文名稱： 產品規(guī)格：250g
Casman瓊脂培養(yǎng)基 英文名稱：Casman Agar Medium 產品規(guī)格：250g
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