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為何進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實(shí)驗(yàn)血清樣本都需要稀釋?
閱讀：170 發(fā)布時(shí)間：2017-9-8 每一盒進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒里面都有一份對(duì)應(yīng)的說明書,，而每一份說明書里都會(huì)有寫樣本和稀釋液的稀釋比例,，為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中，現(xiàn)在為您分析：為何ELISA實(shí)驗(yàn)血清樣本都需要稀釋?
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為什么要稀釋,？有兩個(gè)原因：
1）競(jìng)爭(zhēng)抑制比較明顯,，應(yīng)稀釋競(jìng)爭(zhēng)物；
2）以降低非特異性反應(yīng),，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來,。
血清稀釋用普通的PBS即可，可加1％的BSA,，能有效降低ELISA本底,，當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競(jìng)爭(zhēng)還是間接競(jìng)爭(zhēng),，血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定,，但也不用一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)試驗(yàn)即可,，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),，即你的競(jìng)爭(zhēng)ELISA中陰性孔OD在1.0，這樣作出來的曲線比較敏感,。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的步驟：
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),，比如說10倍,、20倍稀釋（這樣可以大體確定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,，再用一定稀釋度的陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗滌后,，加底物溶液顯色,，終止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度,。進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒一般總是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0,，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2,。也就是要求陽(yáng)性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別,。
常溫，避光 規(guī)格: 50mg *： 鑒別 氨基己酸
常溫,，避光 規(guī)格: 50mg *： 含量測(cè)定 水楊酸
常溫,，避光 規(guī)格: 50mg *： 檢查用 α－甲基吡啶
常溫，避光 規(guī)格: 100mg *： 檢查用 甲磺酸酚妥拉明
常溫,，避光 規(guī)格: 50mg *： 含量測(cè)定 鹽酸萘甲唑林
常溫,，避光 規(guī)格: 50mg *： 檢查用 氨苯砜
常溫，避光 規(guī)格: 100mg *： 含量測(cè)定 阿替洛爾
常溫,，避光 規(guī)格: 50mg *： 含量測(cè)定 倍他米松
常溫,，避光 規(guī)格: 100mg *： 含量測(cè)定 丙酸倍氯米松
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