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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書重復(fù)性差的解決方法
閱讀:426 發(fā)布時(shí)間:2017-6-21elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè),。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP,。再經(jīng)過溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,、B,,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系,。
1、樣品數(shù)量不一,加樣時(shí)間長短不一,。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),,加樣時(shí)間盡可能與*次接近。
2,、樣品加入后未混勻,。解決方法:加樣后在混勻器上充分混勻。
3,、酶標(biāo)儀濾光片不對(duì)或輸入波長不對(duì),。解決方法:TMB顯色用450/630波長。
4,、酶標(biāo)儀測(cè)定重復(fù)性差,。解決方法:校對(duì)酶標(biāo)儀。
5,、洗滌不正確。解決方法:洗滌液注滿各孔但不要溢出,。洗板時(shí)反應(yīng)板面向下,,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈,、無或少塵的吸水材料上拍干,。洗板機(jī)洗板時(shí)不應(yīng)有堵孔,洗滌應(yīng)充分,。
6,、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱),。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書解決方法:恒溫箱溫育較水浴顯色深,, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃。