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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明書(shū)重復(fù)性差的解決方法

閱讀:422          發(fā)布時(shí)間:2017-6-21

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明書(shū)是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育,。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP,。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A,、B,,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色,。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系,。
1、樣品數(shù)量不一,,加樣時(shí)間長(zhǎng)短不一,。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明書(shū)解決方法:重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與*次接近,。
2,、樣品加入后未混勻。解決方法:加樣后在混勻器上充分混勻,。
3,、酶標(biāo)儀濾光片不對(duì)或輸入波長(zhǎng)不對(duì)。解決方法:TMB顯色用450/630波長(zhǎng),。
4,、酶標(biāo)儀測(cè)定重復(fù)性差。解決方法:校對(duì)酶標(biāo)儀,。
5,、洗滌不正確。解決方法:洗滌液注滿各孔但不要溢出,。洗板時(shí)反應(yīng)板面向下,,垂直用力甩凈內(nèi)容物(可多甩幾次),在干凈,、無(wú)或少塵的吸水材料上拍干,。洗板機(jī)洗板時(shí)不應(yīng)有堵孔,洗滌應(yīng)充分。
6,、溫育條件不一致(一次用水育,,一次用恒溫箱)。elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說(shuō)明書(shū)解決方法:恒溫箱溫育較水浴顯色深,, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應(yīng)控制在37℃,。

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