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判定elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書試劑的要求
閱讀:287 發(fā)布時間:2017-6-2方面一:elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書檢驗技師應具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器,、器械,,具有一定總結和分析問題的能力,對ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決,。
方面二:使用校對過的微量移液器,,排除自然誤差。移液器準確與否對定量檢測尤為重要,。
方面三:仔細閱讀說明書嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作,。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方,,反復試驗確定成立后才能改進,。
方面四:洗滌*
洗板不*,酶結合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性,。洗滌液要新鮮,,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗滌液會出現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,,也可能出現(xiàn)假陽性,。
方面五:嚴控反應時間
反應時間過長,酶失活,;反應時間過短,,酶結合物不能與血清中的微生物抗原抗體充分結合,生成物結構松散不牢固,,容易洗掉,,都可能造成假陰性。
方面六
注意elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書保存期,,過保存期的試劑不能使用。
方面七:評估試劑的實用性
試劑的穩(wěn)定與否,,對準確率的高低到頭重要,。在試劑啟用前,應進行陰,、陽對照及樣品反復比照試驗,。
顯色時間過短,加入終止液反應終止后,,底物結合物的量過少,,易ELISA試劑盒出現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時間后顯色,,應判為假陽性,,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后立即顯色,,不可報陽性,,這可能是本底顯色的結果,。
方面九:加樣要準確、快速
如果加樣不準確,,酶生成物的量不能確定,,直接影響顯色結果。顯色的深淺及A值的測定與加入顯色劑和終止液的量有關,,所以加樣應慎重,。要求在一定時間內(nèi)加樣完畢的實驗,如果加樣遲緩,,便出現(xiàn)誤差,,而且elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書試劑長時間暴露在外,尤其室溫過高時,,保存期會縮短甚至失效,。