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鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒實驗原理
閱讀：75 發(fā)布時間：2022-6-10| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 13.6KB |
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鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒說明書
產(chǎn)品名稱: 鹿血清淀粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試劑盒
規(guī)格:96T/48T
保存;2-8℃。
檢測目的:用于檢測血漿,血清及相關(guān)液體等樣本,。例如灌洗液、腦脊液,、血清、血漿,、尿液、胸腹水,、細(xì)胞培養(yǎng)上清,、組織勻漿等標(biāo)本.
檢測種屬:大鼠,、小鼠,、豚鼠,、倉鼠,、裸鼠、兔子,、豬,、犬,、猴,、馬、牛,、馬鈴薯,、鹿,、羊、雞,、鴨,、魚、人,、等動植物,。
試劑盒組成及試劑配制 :
1.酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品),。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶
4. 生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶,。
5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶,。
9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍,。
10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣品收集,、處理及保存方法:
1)血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離,。
2)血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測,。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3)細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或血,。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾,。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同),、標(biāo)準(zhǔn)孔,、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品終稀釋度為 5 倍),。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,。
3. 溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4. 配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5 次,拍干,。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl,空白孔除外,。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗滌:操作同 5,。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘.
10. 終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色),。
11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm 波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行,。
使用注意事項:
1. 試劑盒使用前請保存在2-8℃,。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋,。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底,。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正常現(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液,。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫,。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器(使用zui低頻率),如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻,。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測,。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作,。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行,。
本公司產(chǎn)品僅用于科研,。