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貝類細(xì)胞色素P4503A4ELISA檢測(cè)試劑盒技術(shù)參數(shù)
閱讀：95 發(fā)布時(shí)間：2021-7-16| 提 供 商 | 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 16.8KB |
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貝類細(xì)胞色素P4503A4ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書
貝類細(xì)胞色素P4503A4ELISA檢測(cè)試劑盒的優(yōu)勢(shì)：
1,、專業(yè)的elisa試劑盒企業(yè)(Elisa檢測(cè)試劑盒)
2,、抗體----高效、靈敏,、特異
3,、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好,，空白值低,，孔底透明度高
4、先進(jìn)的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,，可靠性強(qiáng)
5,、購(gòu)買本公司的ELISA試劑盒，免費(fèi)代檢測(cè),，北京地區(qū)免費(fèi)上門取樣
6,、技術(shù)服務(wù)要求：專業(yè)，規(guī)范,，高效
7,、適用于血漿、血清,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
樣本處理及要求：
1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,，應(yīng)再次離心,。
2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)該再次離心,。
3. 尿液：用無(wú)菌管收集,，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清,，保存過(guò)程中如有沉淀形成,，應(yīng)再次離心。胸腹水,、腦脊液參照實(shí)行,。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集,。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液,，細(xì)胞濃度達(dá)到
100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心,。
5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后,，稱取重量。加入一定量的PBS,，PH7.4,。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度,。加入一定量的PBS（PH7.4）,，用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）,。仔細(xì)收集上清,。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用,。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性,。
貝類細(xì)胞色素P4503A4ELISA檢測(cè)試劑盒操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,，然后在di一,、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻,；然后從di一孔,、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,，再各取50μl分別加到第五,、第六孔中，再在第五,、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,，混勻；混勻后從第五,、第六孔中各取50μl分別加到第七,、第八孔中，再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九,、第十孔中,，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。（稀釋后各孔加樣量都為50μl,，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ,，60 ng/L,，30 ng/，15 ng/L）,。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動(dòng)混勻,。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用,。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次,，拍干,。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外,。
7. 溫育：操作同3,。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）,。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
貝類細(xì)胞色素P4503A4ELISA檢測(cè)試劑盒注意事項(xiàng)
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zui好控制在5 分鐘內(nèi),，如標(biāo)本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4. 封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
5. 底物請(qǐng)避光保存。
6. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7. 所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
8. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
9.如需代測(cè)或者樣本暫時(shí)不測(cè)定,，可立即低溫凍存,，溫度越低越好，中間避免反復(fù)凍融,，-20℃以下可保存三個(gè)月,-70℃以下可保存六個(gè)月,。
10.貝類細(xì)胞色素P4503A4ELISA檢測(cè)試劑盒試劑使用須知：
11.（1）請(qǐng)參照相關(guān)法規(guī)、文獻(xiàn),、MSDS等信息,，理解并掌握好試劑的特性，再進(jìn)行安全操作,。
12.（2）通常購(gòu)買試劑時(shí)一定要想到一次性用完,。若估算不足有剩余的話，更加注意其他保管和管理,。
13.（3）萬(wàn)一試劑操作者并非專業(yè)技術(shù)人員,。必須在專業(yè)人士的指導(dǎo)監(jiān)督下進(jìn)行操作。對(duì)于使用后的廢棄物,，不要或者舊的試劑,，應(yīng)按照相關(guān)法律法規(guī)正當(dāng)處理。
14.（4）購(gòu)買后,，請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),；做好預(yù)防顛倒，摔壞的措施和管理體制,；在使用前再次確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng),，做好必要的安全對(duì)策；對(duì)沒有標(biāo)明其危害特性,、有害特性的,，也要慎重地進(jìn)行操作；必須帶好防護(hù)用具,，小心翼翼進(jìn)行操作,。