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馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒實驗原理
閱讀:89 發(fā)布時間:2021-4-9馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒說明書
本產品是即用型PCR試劑盒的改良產品,, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs,、MgCl2,、反應緩沖液、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途,。
1. 方便,,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,,操作步驟已經限度地簡化,,能減少污染,降低實驗誤差,。
3. 本產品A 型含電泳染料,,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作,。
4. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優(yōu)化,,反應的靈敏度高,特異性強,。能擴增各種常見的DNA 樣品,。
5. 產物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應,。
使用及效果:將本產品15 μL 與用戶自備的模板,,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),,反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果,。
技術特點:
1、準確可靠,,臨床雙盲對照試驗>1000例,,結果與金標準測序法比對,,結果一致性大于99%。
2,、高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA,。
3、快速:整個檢測流程只需3小時,。
4,、簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便,。
5,、防污染
6、高特異性:雙重特異性組成,,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,,在延伸中產生熒光,。
馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2,、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,100 U/L,,50 U/L,,25 U/L,12.5 U/L,,6.25 U/L,,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L,。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,其余濃度以此類推,。
3、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml,。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml,。
要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL,、20
µL,、200 µL、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL,、200 µL,、1000 µL)、滅菌雙蒸水,。
具有下列特點:
1.即開即用,,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,,定量準確快速,。
2. 引物經過優(yōu)化,特異性強,。預期的 PCR 產物長度為 560 bp,。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,,便于分析試驗結果。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產品說明書 1份
操作方法:
1產品名稱直接測定
2測定準備
3背景對照測定
4樣品活性測定
5計算樣品活性
馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒備注:
1.本產品為50次操作
2.操作時,,須戴手套
3.操作時,,避免污染母液
4.即刻進行熒光檢測分析
5.本產品染色劑不易洗掉,染色持久
6.本公司提供系列試劑產品
馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序,;2.擴增溫度和延伸溫度,;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù),;5.PCR 反應液的配制,;6.PCR技術的基本原理,;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物,;9.PCR反應體系與反應條件,。
運輸及保存:低溫運輸、-20℃保存,,有效期一年,。