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狷羚皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒實驗原理
閱讀:115 發(fā)布時間:2021-3-26狷羚皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒說明書
本產(chǎn)品是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶,、dNTPs,、MgCl2、反應緩沖液,、PCR 增強劑,、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,,具有廣泛的用途,。
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗,。
2. 快捷,,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,,降低實驗誤差,。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,,PCR 反應液可直接上樣電泳,,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,,反應的靈敏度高,,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品,。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,,引物和水共15 μL 混合后,,直接進行PCR反應(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果,。
狷羚皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒技術特點:
1,、準確可靠,,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,,結果一致性大于99%,。
2、高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA,。
3,、快速:整個檢測流程只需3小時。
4,、簡便:試劑盒提供預混好的試劑,,使體系配置操作簡便。
5,、防污染
6,、高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,,才能延伸,。探針特異性與所檢測基因的PCR產(chǎn)物配對,在延伸中產(chǎn)生熒光,。
組成及試劑配制:
1,、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,,請臨用前15分鐘內(nèi)配制,。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,,同時反復顛倒/搓動以助溶解,,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),,分別配制成200 U/L,,100 U/L,50 U/L,,25 U/L,,12.5 U/L,6.25 U/L,,3.12 U/L,,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,,混勻即可,,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml,。
4,、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5,、 檢測稀釋液B:1×10ml,。
要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機,、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
狷羚皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,,操作簡單,,定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,,特異性強,。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳,。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果,。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
操作方法:
1產(chǎn)品名稱直接測定
2測定準備
3背景對照測定
4樣品活性測定
5計算樣品活性
狷羚皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒備注:
1.本產(chǎn)品為50次操作
2.操作時,須戴手套
3.操作時,,避免污染母液
4.即刻進行熒光檢測分析
5.本產(chǎn)品染色劑不易洗掉,,染色持久
6.本公司提供系列試劑產(chǎn)品
運輸及保存:低溫運輸、-20℃保存,有效期一年,。