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小鼠金屬硫蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠金屬硫蛋白（MT）水平,。用純化的小鼠金屬硫蛋白（MT）抗體包被微孔板，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入金屬硫蛋白（MT）,，再與 HRP標記的金屬硫蛋白（MT）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色,。TMB在   HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的金屬硫蛋白（MT）呈正相關(guān),。用酶標儀在  450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中小鼠金屬硫蛋白（MT）濃度,。
小鼠金屬硫蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作步驟
1.  標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.  加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）,、標準孔、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘,。
4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水  30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30秒后棄去，如此重復 5次,，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液    50μl,，終止反應（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）,。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。測定應在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進行,。
小鼠金屬硫蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多,，推薦使用排槍加樣。
4．請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本  OD值大于標準品孔*孔的 OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）,。
5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用,。
10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準,。
小鼠金屬硫蛋白酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃。
2．有效期：6個