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大鼠肝炎病毒酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
    本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠肝炎病毒(MHV)表達(dá),。用純化的大鼠肝炎病毒(MHV)抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，可與樣品中肝炎病毒(MHV)相結(jié)合，經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的肝炎病毒(MHV)抗體結(jié)合,，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），與CUTOFF值相比較,，從而判定標(biāo)本中大鼠肝炎病毒(MHV)的存在與否,。
操作步驟
編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔,、陽性對照2孔,、空白對照1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）加樣：分別在陰,、陽性對照孔中加入陰性對照,、陽性對照50μl,。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl,。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻,，
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。   
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體,，甩干,，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去,，如此重復(fù)5次,，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,，空白孔除外,。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5,。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻,，37℃避光顯色10分鐘.
終止：每孔加終止液50μl,，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測定：以空白空調(diào)零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
大鼠肝炎病毒酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行,，本試劑不同批號組分不得混用,。
2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完,，板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
3．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結(jié)果,。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染,。
5．底物請避光保存,。
6．試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時,，參考波長為630nm
7．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。終止液為2M的硫酸，使用時必須注意安全,。
大鼠肝炎病毒酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃。
2．有效期：6個月