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小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
閱讀:184 發(fā)布時(shí)間:2017-12-26提 供 商 | 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 | 資料大小 | 254.9KB |
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小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠促黃體生成素(LH),。用純化的小鼠促黃體生成素(LH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,,往包被單抗的微孔中依次加入促黃體生成素(LH),,與 HRP 標(biāo)記的促黃體生成素(LH)抗體 ,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色,。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的促黃體生成素 (LH)呈正相關(guān),。用酶標(biāo)儀在 450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠促黃體生成素(LH)濃度,。
標(biāo)本要
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn),。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,,因 NaN3抑制辣根過(guò)(HRP)活性,。
計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo), OD值為縱坐標(biāo),,在坐標(biāo)紙上,,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù),;或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,,將樣品的 OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,,再乘以稀釋倍數(shù),,
小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,,板條應(yīng)裝入密封袋中保存,。
2.濃洗滌液可能會(huì)有析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,,洗滌時(shí)不影響,。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,,以避免試驗(yàn)誤差,。一次加樣時(shí)間控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,,推薦使用排槍加樣,。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本 OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),,請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,,以避免交叉
6.底物請(qǐng)避光保存,。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)
8.所有樣品,,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理,。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
小鼠促黃體生成素(LH)酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1.試劑盒保存:,;2-8℃,。
2.有效期:6個(gè)月