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D大鼠NaKATP酶聯免疫分析試劑盒技術參數
閱讀：168 發(fā)布時間：2017-11-28| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 63.9KB |
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| 資料類型 | JPG 圖片 | 瀏覽次數 | 168次 |
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D大鼠NaKATP酶聯免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中SD大鼠NaKATP水平,。用純化的SD大鼠NaKATP抗體包被微孔板,，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入NaKATP,，再與HRP標記的NaKATP抗體結合,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過*洗滌后加底物TMB顯色,。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NaKATP呈正相關,。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中SD大鼠NaKATP濃度。
操作步驟
標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支,，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）,、標準孔,、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻,。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用,。
洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置30秒后棄去，如此重復5次,，拍干,。
加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外,。
溫育：操作同3,。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl,，再加入顯色劑B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘,。
終止：每孔加終止液50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
測定：以空白空調零,，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）,。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
D大鼠NaKATP酶聯免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶,，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經常校對其準確性,，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,，如標本數量多,，推薦使用排槍加樣。
請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔,。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數（×n×5）,。
封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染。
6．底物請避光保存,。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理,。
9．本試劑不同批號組分不得混用。
D大鼠NaKATP酶聯免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃,。
2．有效期：6個月