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大鼠X膠原（Col X）酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
閱讀：128 發(fā)布時間：2017-10-19| 提 供 商 | 上海谷研實業(yè)有限公司 | 資料大小 | 140.1KB |
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大鼠X膠原（Col X）酶聯(lián)免疫分析試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠 X膠原（Col X）。用純化的大鼠 X膠原（Col X）抗體包被微孔板,，制成固相抗體,，往包被單抗的微孔中依次加入 X膠原（Col X）,，再與 HRP標記的 X膠原（Col X）抗體 ,，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色,。TMB在 HRP酶的催化下轉化成藍色,，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的 X膠原（Col X）呈正相關。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度（OD值）,，通過標準曲線計算樣品中大鼠 X膠原（Col X）濃度,。
大鼠X膠原（Col X）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書操作步驟
1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋,。
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑,，其余各步操作相同）、標準孔,、待測樣品孔,。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,，待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,，然后再加待測樣品 10μl（樣品zui終稀釋度為 5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部,，盡量不觸及孔壁,，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘,。
4.配液：將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜,，棄去液體，甩干,，每孔加滿洗滌液,，靜置 30秒后棄去，如此重復 5次,，拍干,。
6.加酶：每孔加入酶標試劑 50μl，空白孔除外,。
7.溫育：操作同 3,。
8.洗滌：操作同 5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl,，再加入顯色劑 B50μl,，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液 50μl,，終止反應（此時藍色立轉黃色）,。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）,。測定應在加終止液后 15分鐘以內(nèi)進行,。
大鼠X膠原（Col X）酶聯(lián)免疫分析試劑盒注意事項
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完,，板條應裝入密封袋中保存,。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出,，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果,。
3．各步加樣均應使用加樣器,，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差,。一次加樣時間控制在 5分鐘內(nèi),，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣,。
4．請每次測定的同時做標準曲線,，做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本 OD值大于標準品孔*孔的 OD值）,，請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定,，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
5．封板膜只限一次性使用,，以避免交叉污染,。
6．底物請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行,，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品,，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9．本試劑不同批號組分不得混用,。
10.如與英文說明書有異,，以英文說明書為準。
大鼠X膠原（Col X）酶聯(lián)免疫分析試劑盒保存條件及有效期
1．試劑盒保存：,；2-8℃,。
2．有效期：6個月