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大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）.已知Apelin-17濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將Apelin-17和生物素標記的抗體同時溫育,。洗滌后,，加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,，去除未結合的酶結合物,，然后加入底物A、B,，和酶結合物同時作用,。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Apelin-17的濃度呈比例關系,。
安全性
1,、避免直接接觸終止液和底物A、B,。一旦接觸到這些液體,，請盡快用水沖洗。
2,、實驗中不要吃喝,、抽煙或使用化妝品。
3,、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份,。
樣品收集、處理及保存方法
1,、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激,。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離,。
2、血漿-----EDTA,、檸檬酸鹽,、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒,。
3,、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4,、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎,。1000×g離心10分鐘，取上清液
5,、保存------如果樣品不立即使用,，應將其分成小部分-70 ℃保存,，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血,。如果血清中大量顆粒,，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍,。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。
大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒操作步驟
1、使用前,，將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡,，產(chǎn)生加樣上的誤差。
2,、根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,，能使用復孔的盡量做復孔,。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi)。
3,、加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時,。
4,、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
5,、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育30分鐘,。
6、甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液,，振蕩30秒,，甩去洗滌液，用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌，洗滌次數(shù)增加一次,。
7,、每孔加入底物A、B各50ul,，輕輕振蕩混勻,，37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8,、取出酶標板，迅速加入50ul終止液,，加入終止液后應立即測定結果,。
9、在450nm波長處測定各孔的OD值,。
結 果 判 斷 與 分 析
1,、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標（Y）,，相應的Apelin-17標準品濃度為橫坐標（X）,，做得相應的曲線，樣品的Apelin-17含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,。
3,、檢測值范圍：0-80ng/ml
4、大鼠血小板生成素（TPO）ELISA試劑盒敏感度： 0.1 ng/ml