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技術(shù)文章

雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟

閱讀:121          發(fā)布時間:2023-4-19

雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一,、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,,混勻,;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,,再在第三,、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻,;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,,再在第七,、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五,、第六孔中,,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,,混勻,;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九,、第十孔中,,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉,。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,,60 ng/L,,30 ng/,15 ng/L),。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,,其余各步操作相同)、待測樣品孔,。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,,盡量不觸及孔壁,,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘,。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用,。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,,甩干,每孔加滿洗滌液,,靜置30秒后棄去,,如此重復(fù)5次,拍干,。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3,。

8. 洗滌:操作同5,。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測定:以空白空調(diào)零,,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值),。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒可見分光光度法50管/48樣

γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測試盒可見分光光度法50管/48樣

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)活性測試盒可見分光光度法50管/48樣

抗壞血酸(AsA)含量測試盒紫外分光光度法50管/48樣

脫氫抗壞血酸(DHA)含量測試盒紫外分光光度法50管/48樣

L-半乳糖苷-1,4-內(nèi)酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒可見分光光度法50管/48樣

抗壞血酸氧化酶(AAO)活性測試盒可見分光光度法50管/48樣

抗壞血酸過氧化物酶(APX)測試盒紫外分光光度法50管/48樣

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒紫外分光光度法50管/48樣

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測試盒紫外分光光度法50管/48樣

過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法50管/48樣

丙二醛(MDA)測試盒可見分光光度法50管/48樣

葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒可見分光光度法50管/48樣

多酚氧化酶(PPO)測試盒可見分光光度法50管/24樣

蛋白質(zhì)羰基測試盒紫外分光光度法50管/24樣

二胺氧化酶測試盒可見分光光度法50管/24樣

超氧陰離子測試盒可見分光光度法50管/24樣

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒可見分光光度法50管/48樣


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