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草地夜蛾卵巢細(xì)胞,;Sf9操作步驟

閱讀:397          發(fā)布時(shí)間:2021-8-3

草地夜蛾卵巢細(xì)胞,;Sf9操作步驟:

1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),,吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細(xì)胞,,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,,待貼壁細(xì)胞間間隙變大,、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶,,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,,終止胰酶作用,,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產(chǎn)生大量的氣泡,,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),,隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況,。

2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,,棄去上清,,加入新鮮的培養(yǎng)基,,用吸管小心吹散沉淀,,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),,加入新鮮培養(yǎng)基,,置37℃溫箱培養(yǎng),。

溫馨提示:

1)公司努力實(shí)現(xiàn)為科學(xué)研究提供實(shí)驗(yàn)細(xì)胞技術(shù)服務(wù)。所提供的實(shí)驗(yàn)細(xì)胞及其子代,,不能用于人體實(shí)驗(yàn)和臨床診斷,、治療,。

2)公司細(xì)胞資源中心承諾盡zui大努力對(duì)實(shí)驗(yàn)細(xì)胞資源相關(guān)信息進(jìn)行及時(shí)更新。但限于我們的技術(shù)條件,,中心不保證其準(zhǔn)確性,。

3)從文獻(xiàn)等處引用的信息本中心未進(jìn)行核實(shí),,僅供參考。

4)使用者在接收,、處理,、保存,、丟棄、轉(zhuǎn)讓及使用細(xì)胞的時(shí)候要遵守國(guó)內(nèi)外有關(guān)的法律法規(guī),,充分考慮可能存在的風(fēng)險(xiǎn)和責(zé)任,,采取適當(dāng)?shù)陌踩吞幚泶胧┍M量降低對(duì)健康或環(huán)境的危害。

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