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無乳支原體LAMP試劑盒操作流程
閱讀:167 發(fā)布時間:2021-1-5無乳支原體LAMP試劑盒操作流程:
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,,剩余板條用自封袋密封放回4℃,。
2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL,;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加,。
4. 除空白孔外,,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min,。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,,每孔加滿洗滌液(350μL),,靜置1min,甩去洗滌液,,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板),。
6. 每孔加入底物A,、B各50μL,37℃避光孵育15min,。
7. 每孔加入終止液50μL,,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值,。
特點(diǎn):
1. 即開即用,,用戶只需要提供 DNA 模板。
2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化,,專一性強(qiáng),,只擴(kuò)增無乳支原體,與其他植物沒有交叉反應(yīng),。
3. 提供陽性對照,,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,,PCR 后可以直接上樣電泳,。
5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
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