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MHC/GPLA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒間接法
閱讀:237 發(fā)布時間:2020-5-26MHC/GPLA elisa酶聯(lián)免疫試劑盒間接法:
(1) 抗原包被:用包被液將PEDV抗原作1∶5稀釋包被反應(yīng)板,,每孔100μl,,同時設(shè)陰性細(xì)胞培養(yǎng)物對照孔,,置4℃過夜,。
(2) 洗滌:用洗滌液洗滌2次,,每次2min,,瀝干,。
(3) 加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作1∶100稀釋,加入反應(yīng)板相鄰的兩個孔中,,每孔100μl,。同時作陰、陽性標(biāo)準(zhǔn)血清對照,,置37℃孵育1h,。
(4) 洗滌3次:方法同上。
(5) 加入酶結(jié)合物:用保溫液將酶結(jié)合物作1∶4 000稀釋,,加入反應(yīng)孔中,,每孔100μl,置37℃孵育1h,。
(6) 洗滌3次:方法同上,。
(7) 加入底物:每孔100μl,,置室溫暗盒內(nèi)顯色20min。
(8) 加入終止液:每孔50μl,,靜置5min,。
(9) 測定OD值:用檢測儀,于492nm波長,,按儀器使用及制定標(biāo)準(zhǔn)要求調(diào)節(jié)儀器,,測定各反應(yīng)孔的OD值,記錄結(jié)果,。